MCL1对高级别浆液性卵巢癌生物学行为的影响及其作用机制的研究

发布时间：2017-07-19 16:27

  本文关键词：MCL1对高级别浆液性卵巢癌生物学行为的影响及其作用机制的研究

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【摘要】：研究背景：卵巢癌是病死率最高的女性生殖系统肿瘤,高级别浆液性卵巢癌(high grade serous ovarian carcinoma, HGSOC)是卵巢癌中高侵袭性的常见类型,多数患者确诊时已属晚期,肿瘤已出现广泛转移。现有的手术治疗和化疗可在一定程度上减少肿瘤负荷,但对患者远期生存率并无显著影响。因此,探究卵巢癌的发生发展机制显得尤为重要。髓细胞白血病1基因(myeloid cell leukemia-1, MCL1)属于BCL2家族成员中的抗凋亡因子,功能与BCL2蛋白相似,有抑制细胞凋亡的作用。MCL1作为凋亡调节基因,其表达失衡可导致肿瘤的发生,促进肿瘤的生长,促进肿瘤细胞产生对药物诱导的细胞凋亡的抵抗作用。上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transitions, EMT),是指上皮细胞转化为间质细胞,从而获得间质细胞表型的过程,这一过程需要经过多种生物化学变化。EMT不仅参与胚胎发育、组织重塑、伤口愈合等过程,也是肿瘤发生发展及其转移的重要机制。EMT过程中细胞表面黏附分子减少,细胞黏附能力下降,侵袭迁移能力增加,促进癌细胞发生转移。EMT发生的较经典的分子水平变化是E-cadherin减少,N-cadherin增多。体外及体内研究均表明,上皮间质转化在上皮性肿瘤的浸润播散过程中发挥作用,是上皮来源的肿瘤细胞获得侵袭性的关键分子事件,在恶性肿瘤的发展及转移播散过程中发挥重要的病理作用。迄今为止,尚无研究证明MCL1可影响卵巢癌细胞的侵袭迁移能力,本课题研究MCL1基因在卵巢癌发生发展的生物学作用及其相关机制,并探究MCL1对卵巢癌细胞侵袭迁移能力的影响及其具体作用机制。研究方法：(1)采用免疫组化染色方法检测63例高级别浆液性卵巢癌中MCL1蛋白的表达,并分析其表达水平高低与临床预后和临床相关病理因素的相互关系。(2)蛋白印记实验检测高级别浆液性卵巢癌组织与正常输卵管伞端上皮组织中MCL1的表达水平差异。(3)病毒包装并感染过表达及干扰载体建立稳定表达的MCL1卵巢癌细胞系(MCL1-OVE-A2780和MCL1-OVE-SKOV3与对照细胞系；shMCL1-A2780和shMCL1-HEY与对照细胞系)。(4)细胞相关实验探究MCLl过表达和干扰后对卵巢癌细胞增殖能力,药物敏感性(CDDP)和浸润转移能力的影响。(5)以构建好的过表达及干扰MCL1稳定表达的卵巢癌细胞系为基础,检测相关EMT分子水平,探究MCL1促进肿瘤浸润转移的分子机制。(6)通过裸鼠腹腔内注射卵巢癌细胞,观察体内MCL1表达水平对肿瘤的形成和转移的影响。研究结果：(1)高表达MCL1与高级别浆液性卵巢癌的不良预后相关(P=0.0089)。并且MCL1表达水平和CA125高低和淋巴结转移有明显相关关系(P=0.032,P=0.041)(2)与正常输卵管组织相比,高级别浆液性卵巢癌组织中的MCL1表达水平明显增高,MCL1在不同卵巢癌细胞系中的表达水平普遍高于正常输卵管细胞系。(3)成功构建稳定干扰及过表达卵巢癌细胞系,并通过细胞相关实验证实,MCL1增强卵巢癌细胞增殖能力,降低对化疗药物的敏感性并促进卵巢癌细胞浸润转移。(4)MCL1使卵巢癌细胞发生上皮间质化转变,并改变了E-cadherin和N-cadherin等EMT相关标记物的表达水平。(5)体内腹腔注射实验显示：与对照组相比,过表达MCL1卵巢癌细胞系腹腔转移灶数量显著增多、转移瘤体积更大。研究结论：(1)MCLl在高级别浆液性卵巢癌组织中高表达,其高表达与卵巢癌不良临床预后密切相关。(2)高表达MCL1与卵巢癌的恶性生物学行为相关,可增强卵巢癌细胞增殖能力,降低对化疗药物的敏感性,同时增强卵巢癌的浸润转移能力。(3)MCL1影响卵巢癌浸润转移的机制之一为EMT。
【关键词】：MCL1 生物学行为 高级别浆液性卵巢癌 浸润转移 上皮-间质转化
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 符号说明12-14
• 前言14-16
• 材料方法16-38
• 结果38-41
• 讨论41-44
• 结论44-45
• 附图表45-53
• 参考文献53-55
• 致谢55-57
• 攻读学位期间发表学术论文57-58
• 学位论文评阅及答辩情况表58

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1 韦玉艳;MCL1对高级别浆液性卵巢癌生物学行为的影响及其作用机制的研究[D];山东大学;2016年

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本文编号：563799