经典Wnt信号通路与产后子宫内膜修复的关系
本文关键词：经典Wnt信号通路与产后子宫内膜修复的关系
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【摘要】：目的:研究产后子宫内膜修复过程中是否存在经典Wnt信号通路活性的激活与变化,观察Wnt信号通路激活细胞与产后子宫内膜修复过程细胞的增殖、凋亡情况及各类干细胞标记分布情况的关系,探讨Wnt信号通路对产后子宫内膜修复重构的可能调节效应和作用机制,进而为研究子宫内膜修复异常相关疾病提供治疗的新思路。方法:(1)利用雄性Top-Gal工具鼠,经遗传育种制备雌性β-catenin报告鼠。(2)通过收集产后不同时间点β-catenin报告鼠子宫标本,对其冰冻切片进行x-gal染色,观察产后子宫内膜修复过程中,Wnt/β-catenin信号通路激活所报告的β-半乳糖苷酶表达位置及量的变化;利用TUNEL实验,原位检测产后修复过程中子宫内膜的凋亡情况;利用酶联免疫法(Elisa)检测产后不同时间点β-半乳糖苷酶的活性。(3)收集C57母鼠产后不同时间点子宫组织,利用免疫组织化学方法检测产后修复过程中有关细胞标记物Ep CAM(标记上皮细胞)、CD146(标记间质干细胞)、PDGF-Rβ(标记血管来源间质干细胞)、ABCG2(标记SP细胞)的变化及核增殖抗原Ki67的表达情况;利用Real-time PCR技术分析Wnt信号通路相关基因在产后不同时间点的表达情况及可能存在的意义。结果:(1)报告鼠的子宫内膜在产后修复过程中,x-gal阳性细胞的表达有一定的组织部位特异性和时间特异性表达:主要在腔上皮、近腔侧间质和胎盘结处表达,且在产后0h的腔上皮及产后72h的间质细胞表达水平最高。(2)Elisa结果显示产后β-半乳糖苷酶活性呈梯度下降,于产后96h下降尤甚,与0、12h组有显著性差异(P㩳0.05)。(3)在产后修复过程中,子宫内膜上皮和间质细胞增生和凋亡并存。Ki67组化结果显示产后72h子宫内膜细胞增殖达高峰;Tunnel结果显示,产后24h子宫内膜细胞凋亡达高峰。Ep CAM在所有的腔上皮和腺上皮表达,基质细胞中不表达;PDGF-Rβ仅在子宫内膜间质细胞中表达,且在产后24h内不表达;CD146在子宫内膜上皮和间质细胞中均表达,且与X-gal阳性细胞在子宫内膜腔上皮和间质的时空表达模式相似:在腔上皮细胞的表达,产后修复72h内呈逐渐下降趋势;在间质细胞的表达,产后修复72h内呈上升趋势;ABCG2蛋白在产后子宫内膜的上皮和间质细胞中均有表达,以间质细胞为主,其表达随产后修复时间的延长(96h内)逐渐增加。(4)Wnt7a在产后子宫内膜修复中有显著变化:产后72h、96h组与产后0h、12h组相比,表达明显增高。结论:(1)Wnt信号通路核心介导分子β-catenin可能在产后子宫内膜修复中起调节作用,Wnt/β-catenin信号通路的激活可能促进子宫内膜干细胞分化,修复子宫内膜。(2)在产后子宫内膜修复过程中,存在间质干细胞分化为腔上皮细胞的修复方式。(3)血管源性的干细胞可分化为间质细胞对子宫内膜进行修复。(4)Wnt7a可能参与产后子宫的修复。
【关键词】：β-catenin Wnt信号通路 产后 子宫内膜 修复
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R711.74
【目录】：
- 中英文缩略词表4-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-12
- 第一部分 β-catenin报告鼠的制备12-19
- 1.实验材料12-14
- 2.实验方法14-16
- 3.实验结果16-17
- 4.讨论17-18
- 5.小结18-19
- 第二部分 报告鼠产后子宫Wnt/β-catenin和β-半乳糖苷酶表达情况及子宫内膜细胞凋亡情况19-31
- 1.实验材料19-20
- 2.实验方法20-23
- 3.实验结果23-28
- 4.讨论28-30
- 5.小结30-31
- 第三部分 子宫内膜干细胞及Wnt信号通路在产后子宫内膜修复中作用的探讨31-49
- 1.实验材料31-33
- 2.实验方法33-37
- 3.实验结果37-44
- 4.讨论44-49
- 全文结论49-50
- 参考文献50-53
- 综述53-60
- 参考文献58-60
- 致谢60
【共引文献】
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，本文编号：586454
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