红霉素对TGF-β1刺激HFL-F Smad3及Smad7表达的影响

发布时间：2019-08-01 11:20

【摘要】：目的：探讨红霉素对经转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞（human fetal lung fibroblast, HFL-F）samd3、samd7表达的影响，探讨其是否对成纤维细胞（fibroblast, FB）的增殖和胶原的产生有直接的抑制作用及可能作用机制，为寻求有效的抗肺纤维化药物提供临床治疗的实验基础。 方法：体外培养HFL-F MRC-5至指数生长期，先加入不同浓度的红霉素作用12h，再加入TGF-β1作用一定时间后，采用MTT比色法检测细胞的增殖，筛选出最适的处理浓度。后续试验细胞分组：对照组：细胞使用MEM/NEAA培养基加10％FBS(Hyclone)培养；TGF-β1组：正常培养的HFL-F加入TGF-β1(5μg/m1)刺激24h；红霉素提前组：用最适浓度红霉素预先处理人胚肺纤维细胞12h，再用TGF-β1(5μg/ml)共孵育24h；红霉素延迟组：TGF-β1(5μg/ml)先处理24h，后予以合适的红霉素共培养12h。以上各组细胞，用碱性水解法测定细胞HYP含量，天狼星红染色测细胞层胶原，MTT法测细胞增殖，用RT-PCR的方法检测细胞Smad3、Smad7mRNA表达的水平，用Western blot的方法检测p-Smad3、Smad3、Smad7蛋白表达水平。 结果：与TGF-β1组比较，红霉素组细胞增殖和胶原的含量减少，差异有统计学意义（P 0.05），而红霉素提前组低于延迟组；Smad3mRNA及p-Smad3蛋白在延迟组及提前组中的表达低于TGF-β1组，提前组下降最明显，而smad7的表达高于TGF-β1组，其中提前组表达水平最高。 结论：红霉素抑制TGF-β1刺激HFL-F(MRC-5)增殖及胶原产生，可以预防及延缓肺纤维化形成，其机制可能与上调LFB(lung fibroblast, LFB)Smad7的表达、并抑制p-Smad3蛋白的表达有关。
【图文】：

红霉素提前及延迟处理对 TGF-β1 刺激 MRC-5 细胞增殖的影TGF-β1 组 MRC-5 细胞增殖高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05素提前组(T+Pre-EM)和延迟组(T+Post-EM) MRC-5 细胞增殖均低于 TG差异有统计学意义，而红霉素提前组(T+Pre-EM)细胞增殖低于ost-EM)，，差异有统计学意义（P < 0.05）。（见图 1)

21图 6 红霉素对 TGF-β1 刺激 MRC-5 细胞中 Smad3 蛋白TGF-β1 组细胞中 Smad7 蛋白的表达低于对照组，差异有提前组（T+Pre-EM）Smad7 蛋白表达高于 TGF-β1 组T+Post-EM 组）（见图 7）。三组间差异有统计学意义。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R965;R563.9

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 章巍,刘新民,李海潮,张红;博来霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及TIMP-1、TIMP-2的表达[J];北京大学学报(医学版);2002年06期

2 ;Effect of IFN-γ and dexamethasone on TGF-β_1- induced human fetal lung fibroblast-myofibroblast differentiation[J];Acta Pharmacologica Sinica;2004年11期

3 杨坤禹;刘莉;张涛;伍钢;Claudia Ruebe;Christian Ruebe;胡豫;;基质金属蛋白酶及其组织抑制物在小鼠肺纤维化发生中的作用[J];中华内科杂志;2006年07期

本文编号：2521716