肺炎性衰老的机制与白藜芦醇的干预研究

发布时间：2017-03-17 15:00

  本文关键词：肺炎性衰老的机制与白藜芦醇的干预研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：应用基因芯片技术筛选炎性衰老特征性的炎症细胞因子与受体基因,以及白藜芦醇作用的靶基因,同时检测老年大鼠肺组织中炎性衰老特征性炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10 和 TNF-α mRNA表达水平及白藜芦醇的干预作用。探讨炎性衰老在机体衰老中的作用,以及白藜芦醇干预衰老的可能机制方法：1、清洁级雄性健康SD大鼠30只,随机分为4m、24m和24m+白藜芦醇(Res)三组,每组各10只。自21月满当天开始,24m+Res组予Res(按60mg/kg/d,融于5ml蒸馏水中)灌胃；24m组给予等量蒸馏水灌胃,连续90天。分别取出各组大鼠的肺组织。(1)应用包含112个DNA的炎症细胞因子与受体基因芯片对4m、24m和24m+Res各组大鼠肺组织基因表达进行检测。提取等量的大鼠肺组织mRNA后,分别用cy-3、cy-5逆转录荧光标记,制作cDNA探针,混合后与上述微矩阵芯片杂交。用Scan Array 3000扫描仪扫描杂交信号荧光强度,并利用生物信息学方法对检测结果进行分析,分别绘制4m、24m和24m+Res各组肺组织基因表达谱,对芯片资料进行统计分析以寻找待比较组之间有表达差异的基因。2、取各组大鼠肺组织,抽取总mRNA.采用Realtime PCR法检测肺组织中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α mRNA表达水平。结果：1、在肺组织中,与4m组相比,24m组表达上调(信号比的对数值SLR2)的促炎性反应细胞因子与受体基因10个：Cxcl2、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-1r Ⅱ、IL-6、IL-7、TNF、TNFsf4、TNFsf11,表达下调(SLR-2)的抗炎细胞因子与受体基因有：IL-10rα、TGF-α、TGF-β1共3个。与24m组相比,24m+Res组中表达上调(SLR2)的抗炎细胞因子与受体基因有：IL-10、IL-10rα、 Ccl2、TGF-β3、TGF-βrII共5个,下调(SLR-2)的促炎细胞因子与受体基因有：IL-1β、IL-6、TNF、TNFsf4共4个；上述各组之间的比较都具有统计学显著差异(P0.05)。上述差异表达的炎症细胞因子与受体基因涉及白介素、趋化因子、肿瘤坏死因子等。2、24m组肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA表达水平都显著高于4m组(P0.01),而IL-10 mRNA表达水平明显降低(P0.01)；与24m组比较,24m+Res组TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达水平都明显降低(P0.01)；24m+Res组中IL-10 mRNA水平均显著高于24m组(P0.01),与前面基因芯片结果相符合。结论：1、老年大鼠肺组织内存在促炎性细胞因子基因表达上调,抗炎性细胞因子基因表达下调,导致促-抗炎性细胞因子网络和促-抗炎反应体系平衡失调,这可能是肺炎性衰老发生的机制。2、Res通过下调促炎性细胞因子基因表达和上调抗炎性细胞因子基因表达,重塑促炎/抗炎细胞因子网络动态平衡,达到干预炎性衰老的目的。
【关键词】：炎性衰老 基因芯片 Realtime PcR 白藜芦醇 肺 炎症细胞因子 网络
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.1
【目录】：

• 英文缩略词表4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-24
• 结果24-38
• 讨论38-45
• 结论45-46
• 参考文献46-51
• 综述 炎性反应与衰老51-58
• 参考文献55-58
• 致谢58-59
• 附录59-60

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