【摘要】： 目的 1、观察支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血T淋巴细胞分泌白细胞介素-10(interleukin-10，IL-10)的状态。 2、观察罗格列酮对哮喘患者T淋巴细胞NF-kB活性的影响及可能机制。 方法 选取哮喘患者和健康自愿对照者各10名，抽取外周静脉血10ml用淋巴细胞分离液分离外周血PBMC(peripheral blood mononuclearcells，PBMC)，制成PBMC细胞悬液，悬液贴壁培养2小时分离纯化T淋巴细胞并按如下分组：A1组(健康对照者T淋巴细胞原液组，即于含10％胎牛血清、100U／ml青霉素和100U／ml链霉素、万分之三谷氨酰胺及50μg／ml PHA的RPMI-1640培养基(完全培养基)中培养；A2组(哮喘患者T淋巴细胞原液组)；A3组(哮喘患者T淋巴细胞，在A2组基础上加终浓度为20μmol／1的罗格列酮)。A4组(哮喘患者T淋巴细胞，在A2组基础上加终浓度为20μmol／1的罗格列酮及终浓度为10μg／ml的IL-10抗体)，细胞浓度均为1×10~6／ml。将上述分组细胞置于饱和湿度、37℃、含5％CO2培养箱中培养培养48小时，每次培养的同时都用其完全培养基做无细胞的空白对照组。然后用ELISA法测定培养上清液IL-10浓度，收集细胞并用细胞免疫化学染色检测T淋巴细胞内核因子-kB(nuclear factor-kappaB，NF-kB)活化情况。 统计学方法 用SPSS13.0统计软件进行统计分析，测定值采用均数±标准差((?)±S)表示。在方差齐性基础上完全随机设计的多个样本均数比较采用F检验，完全随机设计的多个样本均数之间的两两比较采用最小显著差异t检验，并将哮喘T淋巴细胞之NF-kB活性与上清液IL-10浓度行直线相关分析，α=0.05，双侧P≤0.05有统计学意义。 结果 培养上清液IL-10浓度：A2组上清液IL-10浓度明显低于A1组(P＜0.05)；A3组上清液IL-10浓度明显高于A2组(P＜0.05)，A1和A3组比较无差别(P＞0.05)；A4组上清液IL-10浓度均低于A1，A2，A3组，即A1，，A3＞A2＞A4。 T淋巴细胞NF-kB活化率：A2组T淋巴细胞NF-kB活化率明显高于A1组(P＜0.05)；A3组T淋巴细胞NF-kB活化率明显低于A2组(P＜0.05)；A2和A4组比较无差别(P＞0.05)，即A2，A4＞A3＞A1。 NF-kB活化率与培养上清液IL-10浓度的相关性：A2组T淋巴细胞NF-kB活性与A2组上清液IL-10浓度成负相关(r=—0.81，P＜0.01)；A3组T淋巴细胞NF-kB活性与A3组上清液IL-10浓度成负相关(r=—0.84，P＜0.01)；A4组T淋巴细胞NF-kB活性与A4组上清液IL-10浓度成负相关(r=—0.82，P＜0.01)。 结论 1、哮喘患者外周血T淋巴细胞分泌白细胞介素-10水平减低。 2、哮喘患者T淋巴细胞NF-kB活性明显增高，可能与IL-10分泌减低有关。 3、罗格列酮明显升高哮喘患者T淋巴细胞源性IL-10水平。 4、罗格列酮可抑制T淋巴细胞NF-kB活性，其机制可能与升高IL-10水平有关。 5、抗IL-10抗体能抑制T淋巴细胞源性IL-10的升高，可能与阻断IL-10分泌有关。
【图文】：
培养的淋巴细胞(加PHA聚集后，100x
培养的淋巴细胞(加PHA聚集前，200/
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R562.25
【参考文献】
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本文编号：
2627035
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