博莱霉素诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖活性的改变及其对肺修复功能影响的实验研究

发布时间：2020-06-01 22:33

【摘要】： 目的：ATⅡ是肺泡上皮的干细胞，参与肺生长发育、损伤修复过程。大量研究表明ATⅡ与肺纤维化关系密切，且在纤维化过程中具有重要作用。近年来，尤其在生理和病理情况下与肺的非呼吸功能颇为被人关注。本实验通过对建立BLM致大鼠肺纤维化模型和BLM处理体外培养的ATⅡ，观察BLM肺损伤大鼠肺组织中ATⅡ的形态结构、增殖活性的变化以及PS 定性、定量分析的方法，研究BLM肺损伤早期ATⅡ增殖活性变化规律及对损伤的肺泡上皮细胞修复功能的影响，为探讨ATⅡ在肺间质纤维化发生中的地位和作用提供实验依据。方法：BLM气管内滴注（4mg.ml~(-1)，5mg.kg~(-1)）制作大鼠肺损伤模型分为3、7、 14、28d组，对照组在同样条件下气管内注入相同数量的生理盐水，方法同实验组。分别行肺组织标本钌红电镜组织化学染色、利用高效液相色谱（HPLC）法、分光光度计法分别测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中PL 及其组分和蛋白质，，流式细胞仪测定BLM处理的体外培养的ATⅡ细胞增殖周期，并作对照分析。结果：（1）对照组PS层呈连续、均匀一致内衬于肺泡腔的电子致密带。AT Ⅱ结构完整、清晰。实验组各组均可见PS层丧失连续、均匀绒状结构，脱落入肺泡腔或聚集成块现象或散落于肺泡腔内，其中以3d组较为明显。钌红阳性表面层的厚度与对照组比较，3d组较厚，且染色深，7、14d组＄·f4L44＋ttk4 一无明显差别，28 d组较淡薄。BALF的PS中 PL总量均趋向于增加。PL组分中磷脂酞甘油（PG）含量3d组升高，7、14、28 d组降低。磷脂酞肌醇（PI）含量变化则与此相反。PG／PI比值在3 d组升高，7、14、28 d组降低。注药后7、14、28 d组P＊们降低（＜oWX 与对照组比较有显著性差异。（2）3、7 d组可见 AT 11变性坏死，甚至崩解，胞质内容物脱落入肺泡腔，以 3 d组较明显。3 d组 AT 11板层小体体积数目减少，板层小体部分或完全空泡化，板层不规则且变薄，并可见肺泡腔散在脱落的板层小体。7d 组板层小体开始数目增多，体积增大，以 14、28 d组较为显著，并可见部分巨大板层小体。AT 11增生各组均可见，以 7 d组较明显。板层小体 3 d 组数量减少，并呈空泡状。7 d组开始增多，以 14、28 d组较为明显。（3） 3、7d组基底膜水肿、裸露，甚至断裂，使血管腔和肺泡腔相通或直接暴露于肺泡腔内，并有炎性细胞和间隔中的成纤维细胞等渗出到肺泡腔内。 14、28 d组也可见断裂基底膜被沉着的细胞外基质（ECM）、纤维素样物质包埋于其中，14 d组可见有 AT 11转化为 ATI，并逐渐伸展、粘附于裸露基底膜。（4）PS中蛋白质的含量，3 d组明显增高以后逐渐下降，28 d 组接近对照组。u）BLM处理的AT 11 GJG；期比例第id明显下降，第2 d 开始逐渐上升，第sd接近对照组水平。死亡细胞（包括凋亡细胞）第id 开始增多，第Zd出现高峰，然后逐渐减少，但第sd仍未达到对照组水平。结论：（）BLM肺损伤早期可导致 AT 11细胞的结构及功能的改变，降低 AT 11细胞的修复能力。（2）BLM肺损伤早期 AT 11具有一定的增殖、分化修复能力，且逐渐增强。（3）PS中磷脂及其组分，尤其 PG和与肺损伤及肺纤维化严重程度相关。（4）蛋白质含量与肺泡炎症程度呈正相关，可作为肺损伤早期损伤和炎症的敏感指标。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2001
【分类号】：R965;R560.2

【参考文献】