尿激酶型纤溶酶原激活物抑制剂—氨氯吡咪对大鼠COPD模型病理改变的影响

发布时间：2020-06-25 22:44

【摘要】： 目的：观察尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)抑制剂氨氯吡咪对大鼠COPD模型病理及病理生理改变的影响，探讨uPA系统成分在COPD发病中的作用。 方法：健康2级雄性Wistar大鼠24只随机分为3组，1组为正常对照组，另外2组用气管内注入脂多糖加烟熏法制作大鼠COPD模型，其中1组为模型组，另1组给予口服氨氯吡咪，为氨氯吡咪组。7周后检测各组大鼠的(1)肺功能；(2)支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及分类；(3)肺组织切片天狼猩红染色观察支气管肺组织的胶原沉积；(4)肺组织切片免疫组化染色观察uPA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白定位和表达；(5)实时荧光定量PCR检测各组大鼠肺组织uPA、uPAR、PAI-1及MMP-9 mRNA的表达。 结果：(1)肺功能：模型组呼气阻力(Re)显著高于对照组[(4.17±0.72)mmHg．s~(-1)．g~(-1) vs(1.95±0.56) mm Hg．s~(-1)．g~(-1)，P＜0.01]和氨氯吡咪组[(4.17±0.72) mm Hg．s~(-1)．g~(-1) vs(1.61±0.25)，P＜0.01]，0.3s用力呼气容积／用力肺活量(FEV_(0.3)／FVC％)、呼气峰流速(PEF)均显著低于对照组[分别为(51.80±3.86)％vs(95.34±2.80)％、(15.37±1.76)ml／s vs(31.57±5.17)ml／s，P均＜0.01]和氨氯吡咪组[分别为(51.80±3.86)％vs(98.46±0.94)％、(15.37±1.76)ml／s vs (41.65±3.21) ml／s，P均＜0.01]； (2) BALF炎性细胞：模型组BALF中白细胞总数及中性粒细胞、单核-巨噬细胞百分比[分别为(6.64±1.43)×10~6／ml、(3.43±1.04)％、(5.35±2.53)％]显著高于对照组[分别为(2.14±0.68)×10~6／ml、(1.13±1.59)％、(1.27±1.18)％]和氨氯吡咪组[分别为(4.17±1.18)×10~6／ml、(1.05±0.20)％、(2.52±1.60)％](P均＜0.001)；对照组和氨氯吡咪组炎性细胞间比较无明显差异； (3)胶原定量分析：模型组Ⅰ型胶原为主的细胞外基质(ECM)在气道壁过度沉积，胶原面积显著高于对照组[(67050±14710)VS(11797±2806)，P＜0.001]和氨氯吡咪组[(67050±14710)VS(17113±5945)，P＜0.001]；而对照组和氨氯吡咪组间胶原定量分析无显著差异； (4) uPA、uPAR、PAI-1及MMP-9的蛋白表达：主要表达在肺内的炎性细胞(巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞)、气道上皮细胞、肺泡上皮细胞和成纤维细胞。模型组大鼠支气管肺组织uPA、uPAR、PAI-1及MMP-9的蛋白表达[分别为(0.166±0.010)、(0.158±0.024)、(0.171±0.012)、(0.159±0.007)]显著高于对照组[分别为(0.137±0.015)、(0.122±0.009)、(0.144±0.005)、(0.128±0.133)]和氨氯吡咪组[分别为[(0.126±0.004)、(0.120±0.010)、(0.122±0.004)、(0.131±0.006)](P均＜0.001)，且uPAR蛋白表达与中性粒细胞百分比成正相关(r=0.754，P=0.031)。氨氯吡咪组uPA、PAI-1蛋白表达显著低于对照组(P＜0.05)。 (5) uPA、uPAR、PAI-1及MMP-9 mRNA的表达：模型组大鼠肺组织uPA、uPAR、PAI-1及MMP-9 mRNA的表达[分别为(4.37±1.85)×10~(-5)、(4.40±1.55)×10~(-5)、(6.61±4.07)×10~(-5)、(5.91±2.52)×10~(-5)]显著高于对照组[分别为(1.30±1.08)×10~(-5)、(2.39±2.05)×10~(-5)、(1.89±0.74)×10~(-5)、(1.85±0.72)×10~(-5)](P＜0.05)。氨氯吡咪组大鼠肺组织uPA、MMP-9 mRNA的表达下降，显著低于模型组(P＜0.05)；uPAR、PAI-1 mRNA水平也有所降低，但与模型组相比无统计学差异(P＞0.05)。 结论：①气管内滴注脂多糖加烟熏法所致COPD大鼠模型支气管肺组织内uPA、uPAR、PAI-1及MMP-9的蛋白和基因表达均显著高于正常对照组； ②应用uPA抑制剂氨氯吡咪可下调uPA系统成分及MMP-9的表达，显著减轻COPD大鼠气道炎症和病理结构改变。提示uPA系统成分可能是COPD病理过程中炎症反应和组织重塑中具有关联作用的重要物质。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R563.9
【图文】：

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【参考文献】

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本文编号：2729429