COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡及JNK、p38表达的实验研究

发布时间：2020-10-21 19:29

　　 目的：观察JNK. p38MAPK信号传导通路对COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响。 方法：100只健康10周龄Wistar大鼠随机分为模型组80只,对照组20只。模型组采用第1-29天,第31-60天熏香烟,第30天气管内注入猪胰弹性蛋白酶(PEE)的方法建立COPD大鼠模型。对照组不熏香烟,在模型组气管内注入PEE的同一天采用同—术式气管内注入等量生理盐水。继续饲养至第90天,以低于对照组大鼠平均体重的90%作为判断发生营养不良的标准,将实验大鼠分为：对照组、COPD营养正常组和COPD营养不良组。取大鼠膈肌、趾长伸肌制备石蜡切片,分别采用TUNEL法测定膈肌、趾长伸肌石蜡切片细胞凋亡率和免疫组织化学法测定JNK、p38的表达,Nikon Eclipse 80i显微镜图像系统测定免疫组化表达强度,所得数据经SPSS 17.0软件进行单因素方差分析、t检验及相关性分析。 结果：1.COPD模型大鼠营养不良组膈肌、趾长伸肌的凋亡率均显著高于对照组(P0.01, P0.01)、COPD模型大鼠营养正常组(P0.01,P0.01)。三组大鼠膈肌凋亡率与趾(?)凋亡率比较,差异无统计学意义(P0.05)。2. JNK、p38在对(?)趾长伸肌中的表达均弱于在COPD模型大鼠营养正常组(P0.01,P 0.01)、COPD模型大鼠营养不良组趾长伸肌中的表达(P0.01, P0.01); JNK、p38在COPD模型大鼠营养不良组膈肌中的表达均强于在COPD模型大鼠营养正常组(P0.01,P0.01)、对照组(P0.01,P0.01)中的表达。JNK、p38在三组大鼠膈肌中的表达与在趾长伸肌中的表达比较,差异无统计学意义(P0.05)。 结论：1.成功复制出COPD大鼠模型。2.骨骼肌细胞凋亡可能是COPD模型大鼠骨骼肌萎缩的机制之一。3. JNK、p38可能参与COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡的发生。
【学位单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R563.9
【部分图文】：

骼肌病理变化(见附图2)鼠趾长伸肌HE切片，光学显微镜下可见:对照组大鼠趾长伸肌肌纤维。慢性阻塞性肺疾病模型组大鼠趾长伸肌的纤维出现萎缩、疏松、紊大，有的小，分布不均。高倍镜下观察:对照组大鼠的趾长伸肌肌COPD营养不良组大鼠的趾长伸肌肌纤维最细。长伸肌、隔肌细胞凋亡率测定组大鼠趾长伸肌、隔肌细胞凋亡率(见附图3)大鼠的趾长伸肌、隔肌组织切片经TUNEL法测定骨骼肌细胞凋亡率，结果均采用Ver.3.00程序软件作图像数字采集及定量分析(以着色镜下视野总面积的百分比确定为骨骼肌细胞凋亡率)。结果显示:疾病营养不良组大鼠的隔肌细胞凋亡率明显高于其它两组大鼠(20%VS11.65士3.07%、4.26士1.19%，P(0.01);慢性阻塞性肺疾病

从慢性阻塞性肺疾病营养正常组、慢性迄塞性肺疾病营养不良组中各随机抽取18只大鼠，每组实验大鼠体重与大鼠趾长伸肌细胞凋亡率呈显著负相关(R二一0.945，P(0.01)。(见图3一5)

常组模型大鼠(P<0.01)，在慢性阻塞性肺疾病营养正常组模型大鼠中的表达均强于对照组 (P<0.01)。JNK在三组大鼠的趾长伸肌与隔肌细胞中的表达比较，差异无统计学意义。(见表3一7、图3一7)表3一 7JNK在各组大鼠趾长伸肌和隔肌细胞中的阳性表达百分比为组别例数隔肌趾长伸肌对照组 186.52士3.69.6.14士3.12COPD营养正常组 18.16.12士3.64*.15.47士3.07*COPD营养不良组 1830.85士5.93*▲.30.58士5.86*▲注:与对照组比较女P<0.01;与COPD营养正常组比较‘P<0.01;与在趾长伸肌细胞中表达的比较.P>0.05nU匕工J任nJ3025拍上长仲肌︵O乙自︵%︶l5lO对照组COPD营养正常组COPD营养不良组图3一 7JNK在各组大鼠趾长伸肌和隔肌细胞中的阳性表达百分比的直方图 3.5.2p38表达:(免疫组化图片见附图4)实验发现p38主要表达在骨骼肌细胞胞浆，显微镜下可见到p38在慢性阻塞性肺疾病营养不良组骨骼肌细胞中的表达均强于其它两组，而且p3s在慢性阻塞性肺疾病营养正常组大鼠骨骼肌细胞中的表达明显强于对照组大鼠。以着棕黄色的面积占显微镜下视野总面积的百分比
【参考文献】

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本文编号：2850509