甘露糖受体在脂多糖诱导的急性肺损伤中的表达

发布时间：2020-11-03 04:13

　　 前言: 甘露糖受体(mannose receptor,MR),作为一个固有的模式识别受体,在巨噬细胞、未成熟树突状细胞及一部分内皮细胞中都有表达,是一种重要的抗原提呈分子和信号转导受体。 急性肺损伤(acute lung injury,ALI),是呼吸系统疾病中的危重症,其定义是:心源性以外的各种肺内外致病因素引起的急性,进行性缺氧性呼吸衰竭,是肺部炎症和通透性增加的综合征。对慢性鼻窦炎和鼻息肉病人的研究发现,鼻息肉患者的鼻窦粘膜处巨噬细胞MR的mRNA有明显的升高。Marzolo MP亦发现脑内巨噬细胞—脑小胶质细胞表面的MR能被地塞米松上调。但是甘露糖受体在急性肺损伤中的表达情况及其在急性肺损伤中的作用机制,目前国内外还未有报道。 目的: 研究甘露糖受体在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤中的表达情况,并探讨其可能的作用机制,为临床药物治疗找寻新的靶点。 方法: 雄性SD小鼠,随机分为3组:1.对照组;2.模型组;3.地塞米松(dexameathone,DXM)(0.5 mg/kg)组。通过气管内滴注LPS(3 mg/kg)建立ALI模型,地塞米松组在滴注前5分和滴注后3小时,尾静脉注射地塞米松(dexameathone,DXM)(0.5mg/kg),对照组注射相应剂量0.9%生理盐水。滴注LPS 6小时后处死动物,行肺湿/干重比,肺渗透指数(pulmonary permeability index,PPI),支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞和中性粒细胞计数,肺和BALF中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotacticprotein 1,MCP-1)活性,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-10检测,并观察光学显微镜下肺损伤的程度。本实验通过实时定量RT-PCR测定各组中甘露糖受体(MR)的含量,并用Western Blot检测核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)的蛋白表达水平,观察急性肺损伤中甘露糖受体的表达情况及其与核转录因子-κB的关系,探讨甘露糖受体在急性肺损伤中的作用及其可能的机制。 结果: 1.甘露糖受体在LPS诱导的急性肺损伤中表达下调:本实验以气管内滴入LPS诱导小鼠产生ALI,动物模型表现出肺泡内PMN的大量渗出,肺泡壁对液体和蛋白的渗透性升高,肺湿/干重比、PPI、BALF中白细胞和PMN计数、肺匀浆中和BALF中MPO、TNF-α和IL-1b水平显著增高,以及肺部的ALI的病理损伤改变。以上均为小鼠ALI的基本特征,提示本实验小鼠ALI模型建立成功。实时定量RT-PCR检测发现急性肺损伤模型中甘露糖受体mRNA的量下降,比正常对照组下降了约20.1%(P＜0.05)。 2.地塞米松拮抗LPS诱导的急性肺损伤炎症并上调MR:LPS组的肺湿/干重比(4.67±0.37)与正常组(4.07±0.31)比较明显升高(P＜0.05),DXM(0.5 mg/kg)静脉注射明显抑制LPS诱导的肺部水肿(P＜0.05)。LPS组肺匀浆中MPO水平升高,与对照组比较上升了58.8%(P＜0.05),地塞米松减少LPS诱导的肺匀浆中MPO活性的上升(P＜0.05)。LPS组的BALF中的TNF-α、IL-1b和MCP-1水平显著上升,分别达到对照组的24倍、12倍和16倍(P＜0.01),DXM(0.5mg/kg)静脉注射明显抑制TNF-α、IL-1和MCP-1(p＜0.05)的活性。实时定量RT-PCR检测发现地塞米松组中甘露糖受体mRNA的量上调,比LPS组增加了约66.3%(P＜0.05)。 3.上调甘露糖受体能抑制LPS诱导的急性肺损伤中NF—κB/p65的表达:WesternBlot检测显示,在正常肺组织中有低水平的NF—κB/p65表达,经LPS(3 mg/kg)刺激6h后肺组织中NF—κB/p65表达明显增高,达到正常对照组的4.5倍。预先给予DXM(0.5mg/kg)静脉注射,能明显抑制LPS所诱导的急性肺损伤中NF—κB/p65高水平表达。 结论: 甘露糖受体在脂多糖诱导的急性肺损伤中表达下调,通过上调其水平能抑制急性肺损伤肺组织中NF—κB/p65蛋白的表达,提示甘露糖受体可能与NF-κB信号通路有关,进而在mRNA水平上抑制LPS所致的急性肺损伤中TNF-α、IL-1β等炎症因子的表达,减轻急性肺损伤中的炎症反应。
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R563.8
【文章目录】：
致谢
中文摘要
英文摘要
缩略词表
正文
    引言
    材料和方法
    结果
    讨论
    结论
参考文献
综述
作者简介

【共引文献】

相关期刊论文 前1条

1 夏长江;孟革;赵建;丁日高;;中性粒细胞在急性肺损伤中的作用机制研究进展[J];国际药学研究杂志;2009年06期

相关硕士学位论文 前10条

1 石娅妮;不同剂量阿托伐他汀对脂多糖致大鼠急性肺损伤的影响[D];泸州医学院;2011年

2 陈洪雷;西地那非治疗急性呼吸窘迫综合征的实验研究[D];第二军医大学;2011年

3 黄璜;双巯氧吡啶（PTS2）对油酸诱导的急性肺损伤的保护作用研究[D];南京大学;2011年

4 王娜;不同剂量盐酸戊乙奎醚对内毒素致急性肺损伤大鼠的保护作用[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2011年

5 陈坤;P-选择素在蝮蛇毒介导的小鼠急性肺损伤的表达研究[D];南华大学;2011年

6 高伟;合并ALI/ARDS腹部外科疾病的临床研究[D];天津医科大学;2011年

7 刘利本;蒲公英提取物对LPS所致小鼠急性肺损伤的保护作用研究[D];延边大学;2011年

8 马涛;高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液对内毒素性急性肺损伤大鼠的实验研究[D];宁夏医科大学;2010年

9 李国涛;新生大鼠高氧急性肺损伤治疗及机制的研究[D];华中科技大学;2010年

10 罗祎;NE在重度脑损伤合并胃液误吸大鼠肺内及血中的表达研究[D];遵义医学院;2011年

本文编号：2868076