超顺磁性四氧化三铁纳米粒子的体内外毒性及其肺部靶向研究

发布时间：2017-05-03 22:03

  本文关键词：超顺磁性四氧化三铁纳米粒子的体内外毒性及其肺部靶向研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：制备壳聚糖(chitosan)和油酸钠(sodium oleate)修饰的SPIONs，研究其体内外毒性效应及其肺部靶向作用。 方法：1化学共沉淀法合成壳聚糖和油酸钠两种不同表面修饰的SPIONs，并对其进行表征。分别用两种SPIONs悬液处理体外培养的人肺腺癌A549细胞，普鲁士蓝染色观察两种SPIONs在细胞内的分布，分别用不同浓度的两种SPIONs处理A549细胞，MTT法测定细胞生长活性，200μg/mL SPIONs染毒A549细胞，测定上清液中LDH的活性，DAPI染色观察细胞凋亡情况。 2将54只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、壳聚糖SPIONs组和油酸钠SPIONs组，口腔内气管插管分别给予两种SPIONs，对大鼠的一般情况进行观察，分别于给药后24h、72h和第14天随机处死每组中6只大鼠，腹腔静脉取血检测主要血生化指标，取BALF，计数细胞总数和中性粒细胞的数量，HE染色观察肺部的病理改变。 3对自制Halbach磁场进行磁场强度的测量，将15只SD大鼠随机分为正常对照组、加磁场组和不加磁场组，雾化给予壳聚糖SPIONs，加磁场组大鼠右侧肺部加Halbach磁场，邻二氮杂菲法检测两侧肺部铁含量，肺部切片普鲁士蓝染色显示铁分布。 结果：1（1）两种SPIONs均为粒径20-30nm左右的类球形结晶。(2)普鲁士蓝染色显示细胞内可见蓝色沉着。(3)MTT结果显示壳聚糖SPIONs对细胞生长几乎无抑制，，而200μg/mL油酸钠SPIONs在48h和72h时对细胞有明显的抑制作用(Ｐ0.05)。（4）200μg/mL壳聚糖SPIONs染毒细胞的上清液中LDH含量稍高于正常对照组(Ｐ0.05)，而100μg/mL和200μg/mL油酸钠SPIONs染毒细胞的上清液中LDH含量明显高于正常对照和壳聚糖SPIONs组(Ｐ0.05)。（5）DAPI凋亡检测显示壳聚糖SPIONs染毒细胞与对照组没有明显差异，而油酸钠SPIONs染毒细胞发生明显的细胞核皱缩，细胞核碎裂现象，且细胞凋亡率明显高于正常对照组(Ｐ0.05)。 2（1）实验组血清中的主要血生化指标仅有24小时TP含量、第14天ALP含量测定油酸钠SPIONs组高于正常对照组(Ｐ0.05)。（2）实验组BALF中的细胞总数和中性粒细胞数在24h和72h均高于正常对照组(Ｐ0.05)，且油酸钠SPIONs组明显高于壳聚糖SPIONs组(Ｐ0.05)。（3）实验组的肺部HE染色可以明显看到肺部炎症表现，油酸钠SPIONs组炎症表现更严重，壳聚糖SPIONs组肺损伤有自我修复的趋势。 3（1）磁场强度测量显示Halbach磁场呈现锥形。（2）加磁场组与不加磁场组左右两侧肺部的铁含量与正常对照组相比均有所增高。加磁场组右侧肺部的铁含量显著高于左侧(Ｐ0.05)。（3）右侧肺部的切片上可见蓝色颗粒，而左侧则很少，右侧肺部的铁分布要高于左侧。 结论：壳聚糖SPIONs与油酸钠SPIONs相比具有较低的细胞毒性，肺部急性毒性效应也相对较低。壳聚糖SPIONs在加磁场作用的一侧肺部分布较多。
【关键词】：SPIONs 壳聚糖 油酸钠 毒性 肺部靶向
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R521
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-13
• 第一部分 壳聚糖和油酸钠修饰的超顺磁性四氧化三铁纳米粒子的制备及其细胞毒性研究13-25
• 前言13
• 1 材料和方法13-16
• 2 结果16-17
• 3 讨论17-19
• 附图19-22
• 参考文献22-25
• 第二部分 两种超顺磁性四氧化三铁纳米粒子对大鼠肺部的急性毒性效应25-35
• 前言25
• 1 材料和方法25-27
• 2 结果27-29
• 3 结论29-31
• 附图31-33
• 参考文献33-35
• 第三部分 超顺磁性四氧化三铁纳米粒子的肺部靶向研究35-42
• 前言35
• 1 材料和方法35-37
• 2 结果37-38
• 3 讨论38-40
• 附图40-41
• 参考文献41-42
• 全文总结42-43
• 文献综述43-55
• 参考文献50-55
• 致谢55-56
• 攻读硕士期间所发表的论文56-57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 张银燕,尹衍升,张金升,马来鹏;纳米Fe_3O_4磁性液体稳定性的研究[J];化学物理学报;2004年01期

2 陈延明;聂晓波;李凤红;马启朋;;油酸钠为稳定剂合成CdS(CdSe)纳米粒子及表征[J];沈阳工业大学学报;2013年04期

3 李黎;马力;;Fe_3O_4磁性微粒的制备及表征[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年34期

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本文编号：343809