矽肺纤维化靶向miRNAs筛

发布时间：2021-11-17 21:44

　　矽肺（Silicosis）是由于长期吸入含游离大量二氧化硅（silicon dioxide,SiO2）的工业性粉尘所引起的职业性疾病,以矽结节的形成和弥漫性肺间质性纤维化为主要病理特点。矽肺纤维化发生机制复杂,脱离粉尘环境后肺纤维化仍继续进展,目前尚无有效的治疗手段,且缺乏敏感有效的诊断指标,这些问题给矽肺纤维化的防治工作带来了极大的困难与挑战。因此,深入探讨矽肺纤维化的发生、发展机制及寻找有效的防治靶点一直是职业病研究领域中的重点、难点任务。微小RNAs（microRNAs,miRNAs）是一类由内源基因编码的长度约为18-24个核苷酸的非编码单链RNA分子,参与调控细胞的增殖、分化、凋亡等多种生理、病理过程,其是多种疾病的重要发病机制,也可作为某些疾病潜在的标记物。在本研究中,建立了吸入性矽肺大鼠模型,首先采用高通量测序技术筛选肺组织内差异表达的miRNAs,并进行相应的生物信息学分析;其次,对差异变化最为明显的miRNAs在体内外进行验证,并分析其对Ⅰ型胶原（collage type Ⅰ,Col Ⅰ）和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表... 

【文章来源】：河北医科大学河北省

【文章页数】：188 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

矽肺大鼠肺组织HE、VG染色形态图（×400）

43在对照24周组大鼠肺组织中仅表达于气管、支气管及血管周围平滑肌，而在染尘24周组的肺组织中α-SMA强阳性表达于矽结节及周围间质成分中；图2蛋白质免疫印迹（westernblot）实验结果显示，与对照24周组比较，在染尘24周组肺组织中的α-SMA和ColI蛋白的表达量均显著增高，其分别增高为对照组的10.61倍和2.75倍，差异具有统计学意义（P＜0.05）。图2免疫组织化学染色法（×400）和蛋白质免疫印迹法检测矽肺大鼠肺组织中α-SMA和ColI的表达Fig.2Theexpressionofα-SMAandColIinlungtissueofsilicosisratmeasuredbyimmunohistochemicalstaining(×400)andwesternblot2.矽肺大鼠肺组织中差异表达miRNAs的筛选及生物信息学分析2.1矽肺大鼠肺组织中差异表达的miRNAs高通量测序分析技术结果见表3所示，染尘24周组与对照24周组数据进行比较，以差异倍数|log2(foldchange)|≥1且P＜0.05时为组间差异有显著性，总共获得有统计学意义的差异miRNAs为70个；其中与对照组相比，在矽肺组大鼠肺组织中log2(foldchange)＞1为miRNAs表达上调，表3中显示表达上调的miRNAs为41个；同时log2(foldchange)＜-1为miRNAs表达下调，表3对照24周组（C24W）染尘24周组（S24W）C24WS24Wα-SMA(43KD)Tubulin-α(55KD)ColI(130KD)α-SMA(IHC)

46续表3NO.miRNA名称对照组含量矽肺组含量log2(foldchange)P-value61rno-miR-124-3p0.78780-6.29980.01792962rno-miR-4310.82760-6.37090.00086863rno-miR-873-3p0.94940-6.56890.00048364rno-miR-325-3p0.95190-6.57270.0137865rno-miR-137-3p1.04150-6.70250.00033866rno-miR-1193-3p1.04330-6.7050.00030167rno-miR-433-3p1.11450-6.80030.00020568rno-miR-409a-5p1.39190-7.12099.55E-0569rno-miR-370-3p2.51950-7.9771.17E-0670rno-miR-411-3p2.5470-7.99279.76E-072.2矽肺大鼠肺组织中差异表达miRNAs的筛选火山图与对照24周组比，染尘24周组中差异表达的miRNAs在火山图中展示（图3），红色点表示miRNA表达上调，绿色点表示miRNA表达下调，灰色点表示miRNA表达没有变化。以|log2(foldchange)|≥1为且P＜0.05阈值，在矽肺组大鼠肺组织中共筛选出，表达上调的miRNA为41个，表达下调的miRNA为29个。图3矽肺大鼠肺组织中差异miRNAs的筛选火山图Fig.3ThedifferentialmiRNAsinlungtissuesofsilicosisratsshowedinVolcanoPlot

【参考文献】：
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本文编号：3501692