吸入硫化氢对大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤的干预作用

发布时间：2017-09-03 19:42

  本文关键词：吸入硫化氢对大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤的干预作用

  更多相关文章： 烟雾吸入性损伤 硫化氢 氧化应激 急性肺损伤 核因子-κB

【摘要】：烟雾吸入性损伤是火灾后人群死亡的重要原因，火灾后超过30%的烧伤病人合并有烟雾吸入性损伤，烟雾吸入性损伤使烧伤相关病死率增加20%，使烟雾吸入/烧伤合并伤的病死率达到30-90%。烟雾吸入性损伤重者发生中毒性肺炎或肺水肿，严重者极易导致急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratorydistress syndrome，ALI/ARDS)。因临床尚无特异性治疗方法，病死率很高，是呼吸及危重病科治疗中的难题，同时也是战伤研究的热点之一。 近些年的研究中，内源性硫化氢(hydrogen sulfide，H2S)一改既往“有臭鸡蛋气味的废气”形象，被称为继一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化碳(carbon monoxide，CO)之后的第三种气体信号分子，具有抗氧化应激、调节炎症反应、舒张血管、抗纤维化、参与调节内分泌及生殖系统功能等作用。实验证实，低剂量的外源性H2S气体吸入(对于小鼠有效且无副损伤的吸入方式为80ppm6h)或低剂量的H2S供体应用于多种原因所致的肺损伤动物模型，可起到减轻肺损伤、保护肺脏的作用。但吸入H2S气体干预烟雾吸入性肺损伤的研究尚无报道。因此本课题设计吸入H2S气体应用于棉花烟雾吸入性肺损伤的大鼠模型，观察其干预效果并探讨相关的机制。研究目的 1、设计制作大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤模型。 2、观察吸入H2S气体80ppm6h对棉花烟雾吸入性肺损伤大鼠的干预效果，并完善相关指标的检测。 3、观察吸入H2S气体80ppm3h或6h对棉花烟雾吸入性肺损伤大鼠干预效果的差异，同时探讨在这一过程中的相关分子机制。研究方法 1、参考既往文献，设计制作大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤模型，，行血气分析，观察肺大体及肺组织病理学，ELISA法检测大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid，BALF)中总蛋白、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-8(IL-8)浓度、肺组织丙二醛(malondialdehyde，MDA)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)浓度。 2、复制棉花烟雾吸入性肺损伤的大鼠模型，吸入H2S气体80ppm6h，行前述指标检测，同时ELISA法检测肺组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxidesynthase，iNOS)、核因子-κBp65片段(the p65subunit of nuclear factor kappaB，NF-κBp65)浓度，荧光定量PCR法行肺组织iNOS mRNA定量。 3、复制棉花烟雾吸入性肺损伤的大鼠模型，分别吸入H2S气体80ppm3h或6h，行前述指标及肺湿干重比检测，同时ELISA法检测肺组织中NO、谷胱甘肽(glutathione，GSH）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl cysteine synthetase，γ-GCS)浓度，免疫组化检测肺组织NF-κBp65、核因子-E2相关因子(nuclear factor-E2relatedfactor，Nrf2)并进行半定量分析，荧光定量PCR法行肺组织γ-GCS mRNA定量。 结果 1、与正常对照组比较，大鼠棉花烟雾吸入致伤后6h肺组织可见明显充血、水肿，表面大部分区域有鲜红色至深红色出血，镜下见肺泡结构弥漫性破坏，腔内可见透明膜及漏出的红细胞，肺泡间隔增厚，炎症细胞明显浸润等典型的肺损伤表现，BALF中总蛋白、IL-1β、IL-8浓度明显升高，肺组织MDA、MPO浓度均升高，也支持急性肺损伤的诊断。 2、烟雾吸入后立即予以80ppm H2S气体吸入6h，大鼠肺损伤的组织病理学表现明显减轻，氧合指数升高，BALF中总蛋白、IL-1β、IL-8浓度降低，肺组织中MDA、MPO、iNOS、NF-κBp65浓度、iNOS mRNA相对表达量均降低。但健康大鼠吸入80ppmH2S气体6h有轻度的肺损伤表现。 3、烟雾+H2S3h组和烟雾+H2S6h组两组大鼠的肺组织病理学、动脉血氧分压、肺湿干重比、MDA等指标对比无明显差别，可认为两者减轻肺损伤的效果相似，并且两组大鼠肺组织中NF-Bp65或Nrf2的累积光密度、iNOS mRNA或γ-GCS mRNA的相对表达量、NF-Bp65、iNOS、NO、GSH浓度均降低，γ-GCS浓度无明显差异。但健康大鼠单纯吸入80ppmH2S气体3h无明显肺损伤表现。 结论 1、棉花烟雾吸入可导致大鼠急性肺损伤，吸入致伤后6h大鼠的氧合指数、肺湿干重比、BALF中总蛋白、IL-1β、IL-8浓度、肺组织中MDA、MPO浓度等检测指标与人类急性肺损伤的表现相似。 2、吸入H2S80ppm6h可通过抑制氧化应激和炎症反应而减轻大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤，但吸入H2S80ppm6h也可能导致大鼠轻度肺损伤。 3、吸入H2S减轻大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤的机制可能是吸入H2S抑制了NF-κBp65的激活，使iNOS mRNA的转录合成减少，减少了iNOS的表达和NO的合成，从而减轻氧化应激反应，减轻了大鼠的肺损伤。吸入80ppm H2S可减轻大鼠烟雾吸入性肺损伤，但时间不可过长，3h是适宜时间，6h可导致肺损伤。
【关键词】：烟雾吸入性损伤 硫化氢 氧化应激 急性肺损伤 核因子-κB
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.8
【目录】：

• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 英文缩略词表11-12
• 前言12-17
• 参考文献15-17
• 第一部分 大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤模型的建立17-31
• 一、材料与方法17-21
• 二、结果21-29
• 三、讨论29-30
• 参考文献30-31
• 第二部分 吸入硫化氢对大鼠烟雾吸入性肺损伤的干预作用31-53
• 一、材料与方法31-34
• 二、结果34-48
• 三、讨论48-50
• 参考文献50-53
• 第三部分 吸入硫化氢干预大鼠烟雾吸入性肺损伤中的氧化/抗氧化反应53-75
• 一、材料与方法53-55
• 二、结果55-69
• 三、讨论69-72
• 参考文献72-75
• 全文总结75-76
• 综述一 ALI/ARDS 与细胞信号转导76-87
• 参考文献84-87
• 综述二 烟雾吸入性 ALI/ARDS 与细胞应激87-95
• 参考文献92-95
• 综述三 火灾后烟雾吸入性损伤的救治95-105
• 参考文献102-105
• 论文发表情况105-106
• 致谢106

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 王敦,冯中明,刘旭盛,黎鳌,杨宗城,姜坤元,魏钜菊,傅琼芳,刘明政,王振国;大鼠烟雾吸入性损伤模型[J];第三军医大学学报;1989年05期

2 周敏,姚斌,严尚学,李涛,朱捷,王伟,郝建;爆炸及火药燃烧致吸入性肺损伤大鼠实验模型的建立[J];解放军医学杂志;2005年08期

3 刘一凡;唐红卫;吴小利;谢尹晶;张洪瑞;段晋燕;向代军;兰晓梅;李绵洋;王成彬;李登清;;黑火药烟雾致吸入性肺损伤大鼠模型的建立与评价[J];解放军医学杂志;2013年08期

4 谢尔凡，杨宗城，王孰，傅琼芳，魏钜菊;大鼠烟雾吸入性损伤模型的制作[J];中国实验动物学杂志;1994年04期

5 刘小龙;查天建;;浅谈突发性成批烧伤患者的救治策略[J];中华损伤与修复杂志(电子版);2010年06期

6 马晓春;王辰;方强;刘大为;邱海波;秦英智;席修明;黎毅敏;;急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征诊断和治疗指南(2006)[J];中国危重病急救医学;2006年12期

7 孙磊;李代波;曹佳;;急性烟雾吸入性肺损伤药物治疗的研究进展[J];中华哮喘杂志(电子版);2011年04期

本文编号：787008