直接铺种结合改良组织块培养法可有效分离人骨髓中的间充质干细胞

发布时间：2017-10-15 16:24

  本文关键词：直接铺种结合改良组织块培养法可有效分离人骨髓中的间充质干细胞

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【摘要】：骨髓是间充质干细胞(MSC)的重要来源。研究显示,标准密度梯度离心法分离骨髓MSC的效率不高,骨髓小粒是造成该法低效的原因。通过组织块法分离骨髓小粒,再结合标准法,可从单份骨髓标本分离获得更多MSC,然而这种方法费时费力。本研究探求分离骨髓MSC更简单、更有效的方法。收集7例正常人骨髓标本,低速离心沉降,用改良组织块法培养漂浮在液面上层骨髓小粒中的MSC,用直接铺种法培养沉降在底层的MSC。然后对MSC进行免疫表型和分化能力鉴定。结果表明:在7例标本中,有3例骨髓小粒漂浮在液面上层,其余骨髓细胞包括部分小粒沉降在底层;漂浮小粒中的MSC可用改良组织块法获得,沉降在底层的MSC可用直接铺种法获得。分离的MSC传代3次后不表达CD45、CD34,表达CD105、CD73、CD44、CD90、CD49e,能向软骨和脂肪细胞分化。结论:以直接铺种法为主、改良组织块培养法为辅,可简单、高效地分离人骨髓中MSC。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室;辽宁医学院附属第一医院血液科;
【关键词】： 间充质干细胞 骨髓 直接铺种法 改良组织块培养法
【基金】：国家自然科学基金(编号81270575) 天津市自然科学基金(编号11JCYBJC10500,09JCYBJC11000)资助
【分类号】：R329
【正文快照】： 骨髓是间充质干细胞(MSC)的主要来源。目前,从人骨髓中分离MSC的方法可分为三种:①先用密度梯度离心法分离单个核细胞(MNC),再培养和扩增得到MSC———即所谓的标准培养法[1-3];②采用全骨髓直接铺种法[4,5];③用特异性抗体筛选阳性或阴性细胞群,然后进行培养和扩增[5,6]。这

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