日本血吸虫SjIrV1的基因特性及免疫保护效果

发布时间：2017-10-16 06:32

  本文关键词：日本血吸虫SjIrV1的基因特性及免疫保护效果

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【摘要】：钙结合蛋白是日本血吸虫生长发育不可缺少的蛋白,具有非常广泛而重要的功能。在课题组日本血吸虫体被表膜蛋白研究基础上,利用PCR技术克隆了中国大陆株日本血吸虫66 kDa钙结合蛋白(SjIrV1)编码基因的cDNA序列,BLAST分析与菲律宾株日本血吸虫SjIrV1 cDNA编码序列一致,荧光定量PCR分析表明该基因在童虫和成虫期不同发育阶段均有表达,其中在35 d和42 d成虫中表达量较高,在42 d雌虫中该基因表达水平远高于42 d雄虫。构建重组表达质粒pET28a(+)-SjIrV1,在大肠杆菌中成功诱导表达,重组蛋白主要以可溶性形式存在,通过高效液相色谱法(RP-HPLC)以及串联质谱法(MS/MS)鉴定所获蛋白为目的蛋白SjIrV1。蛋白质印迹(Western blotting)分析结果显示重组蛋白能被感染日本血吸虫鼠血清和免疫鼠血清所识别,SjIrV1蛋白在虫体各发育阶段中均表达。免疫荧光染色实验观察表明SjIrV1主要分布在日本血吸虫成虫的表膜。应用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫鼠血清中检测到较高水平的特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体。结果表明SjIrV1可能在日本血吸虫的生长发育过程中起着重要作用。
【作者单位】： 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室;厦门大学生命科学学院;
【关键词】： 日本血吸虫 钙结合蛋白 表达 免疫原性 免疫保护
【基金】：国家自然科学基金(No.31172315) 上海科技发展基金(No.12140902700) 中国博士后科学基金(No.2012M510630)资助~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 血吸虫病是由血吸虫感染引起的一种慢性寄生虫病,被世界卫生组织认为是仅次于疟疾的第2个最具社会经济破坏性的寄生虫病,全球有数以百万的人感染[1-2]。寄生于人体的血吸虫主要有3种:日本血吸虫、曼氏血吸虫和埃及血吸虫,其中在我国流行的血吸虫病是由日本血吸虫(中国大陆株)

【参考文献】

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1 何毅勋,杨惠中;日本血吸虫发育的生理学研究[J];动物学报;1980年01期

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4 梁幼生;李洪军;戴建荣;汪伟;曲国立;陶永辉;邢云天;李幼子;钱科;魏剑英;;血吸虫对吡喹酮抗药性的研究ⅩⅢ日本血吸虫吡喹酮抗药性的实验诱导[J];中国血吸虫病防治杂志;2011年06期

5 张e，

本文编号：1041147