EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析

发布时间：2017-10-19 03:13

  本文关键词：EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析

  更多相关文章： 鼻咽癌 EB病毒 潜伏膜蛋白A 多克隆抗体 重组基因

【摘要】：目的:制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串联蛋白并分析其免疫学特性。方法:用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位,将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,经大肠杆菌BL21表达并纯化。制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定后,免疫小鼠制备多克隆抗体,以ELISA检测抗体的效价,免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性。结果:通过原核表达与纯化,获得高纯度的表位融合蛋白,经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体,该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析。结论:本研究制备的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体,为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础。
【作者单位】： 南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室;江苏省省级机关医院耳鼻咽喉科;南京医科大学第二附属医院病理科;南京军区军事医学研究所;
【关键词】： 鼻咽癌 EB病毒 潜伏膜蛋白A 多克隆抗体 重组基因
【基金】：南京医科大学科技发展基金重点项目(NY2005 D2D13) 江苏省自然科学基金(BK2008481) 江苏省科技厅社会发展支撑计划项目(BE2009152)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： 鼻咽癌是来源于鼻咽上皮的高度恶性肿瘤,肿瘤进展极易侵犯颅底等重要结构,并较早发生颈部淋巴结转移和远处转移。在初诊的患者中,Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌约占总病例的70%左右。放疗在过去很长一段时间都是鼻咽癌的标准治疗方法,但单纯放疗鼻咽癌的5年生存率仅50%左右,而晚期鼻咽癌(Ⅲ

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 袁方,K.Takada,曾毅;用转染EB病毒基因片段的真核细胞检测鼻咽癌病人的抗EB病毒核抗原-1(EBNA-1)抗体[J];病毒学报;1989年02期

2 唐思洁;张凤鸣;杨宗琪;陈勇;左祖英;刘隆跃;周天明;;抗EB病毒膜抗原单克隆抗体的制备及鉴定[J];川北医学院学报;1991年03期

3 金传芳,范江,杜滨,H.Wolf,曾毅;应用蛋白印迹法检测鼻咽癌病人血清中抗Epstein—Barr病毒IgA/EA抗体[J];病毒学报;1988年03期

4 蓝轲;EB病毒BNLF-1基因研究的新进展[J];生命科学;2001年01期

5 皮国华,曾毅,余世荣,方仲,赵全璧,De-ThéG.;测定Epstein-Barr病毒IgA/EA抗体的改进方法[J];病毒学报;1986年04期

6 纪志武，李宝民，，叶淑清，曾毅;EB病毒Zebra基因（BZLF1）在大肠杆菌中的表达[J];病毒学报;1994年01期

7 韩汝晶,F.Huang,E.Kieff,曾毅;鼻咽癌病人EB病毒EBNA-2A及EBNA-LP IgG和IgA抗体的测定[J];病毒学报;1990年03期

8 纪志武,李洪波,H.Wolf,曾毅;Epstein-Barr病毒旱期抗原P138和P54基因的重组与表达[J];病毒学报;1990年04期

9 罗晨美,黄培根;Epstein-Barr病毒相关的淋巴细胞确定的膜抗原和潜伏感染膜蛋白的某些生物学特性及其与鼻咽癌关系的研究进展[J];病毒学报;1989年04期

10 范江,曾毅,M·Motz,H·Wolf;EB病毒壳抗原在大肠杆菌中的表达及纯化[J];中国医学科学院学报;1989年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 刘文博;陈媛媛;李德朋;付云贺;张乃生;郭梦尧;杨正涛;;奶牛黏附分子MadCam-1基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集（下册）[C];2011年

2 郑碧;张耀洲;;家蚕小热休克蛋白BmHSP 22.6基因的表达及功能初步研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年

3 尤强;程琳玲;王颖;王树军;张惠珍;葛海良;周光炎;;CML66基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

4 葛红秀;解纯刚;张耀洲;;家蚕calcyphosphine基因的克隆表达及纯化[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年

5 汲生芝;张耀州;;一个家蚕新基因的克隆表达与功能研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年

6 秦莉;吴少庭;王西明;袁仕善;黄达娜;雷民军;潘晖榕;高世同;张仁利;屈伸;;SARS冠状病毒S蛋白片段2的表达纯化与多克隆抗体的制备[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年

7 王惠群;李合松;刘素纯;梁艳萍;;对生长素多克隆抗体制备方法的几点改进[A];2005年全国植物生长物质研讨会论文摘要汇编[C];2005年

8 孟庆玲;才学鹏;乔军;景志忠;张艳;田广孚;郭爱疆;;中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其多克隆抗体的制备[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年

9 孟庆玲;才学鹏;乔军;景志忠;张艳;田广孚;郭爱疆;;中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其多克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年

10 鲁云霞;孙玉秀;汪凌云;秦宜德;陈利春;;人视黄醇结合蛋白4的克隆、表达和纯化及初步应用[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年

中国重要报纸全文数据库 前9条

1 杨虚杰;敏锐的科学洞察力从哪里来[N];中华读书报;2009年

2 杨焕星;硒元素人体健康之友[N];中国国土资源报;2003年

3 康娟;“万能细胞”来自皮肤而非胚胎[N];解放日报;2007年

4 奇云;人类为何需要性的进化[N];北京科技报;2005年

5 农文;花生根细胞壁有吸收磷酸的功能[N];河南科技报;2002年

6 滕继濮;哈佛专家将老鼠大脑“染”成七色“彩虹”[N];科技日报;2007年

7 红轩;植物专家解读红豆杉神奇奥秘[N];经理日报;2009年

8 刘霞;中国南北方人基因差异0.3%[N];上海科技报;2009年

9 刘霞;中国南北方人基因有0.3%的差异[N];科技日报;2009年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 张衍国;EB病毒蛋白对培养B细胞产生免疫球蛋白的影响及gp350相关肽段的克隆和表达[D];第四军医大学;2002年

2 马毅;肌肉抑制素基因工程疫苗原型的研究[D];中国农业大学;2005年

3 孙铭娟;Angioarrestin的克隆表达及其生物学作用机理的初步研究[D];第二军医大学;2006年

4 贾艳;猪源肺炎克雷伯菌菌毛致病的分子基础及其免疫相关抗原表位的筛选[D];吉林大学;2007年

5 马丽艳;海洋细菌褐藻胶裂解酶在大肠杆菌中表达，加工与转运及重组酶的纯化与性质研究[D];中国海洋大学;2007年

6 王冬梅;口蹄疫病毒VP1及多抗原表位基因在植物表达的研究[D];华南热带农业大学;2007年

7 郑晶;创伤弧菌溶细胞毒素及金属蛋白酶的基因克隆、蛋白表达、抗体制备及其致病性研究[D];南方医科大学;2008年

8 刘仁沿;我国贝类中赤潮毒素腹泻性贝毒免疫检测技术研究[D];大连海事大学;2008年

9 孙萍;特异性沉默EBV潜伏期基因BHRF1pSUPER retro RNAi系统的构建和初步应用[D];山东大学;2006年

10 占利;淋球菌外膜蛋白NspA在大肠杆菌中高效表达及其性能的初步研究[D];四川大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 徐永春;EB病毒Rta重组蛋白多克隆抗体的制备与初步应用研究[D];四川大学;2005年

2 侯秋莲;鹅细小病毒VP2基因片段在原核系统中的表达及多克隆抗体的制备[D];新疆农业大学;2005年

3 刘鑫;PDIP1γ基因的克隆、表达及功能初步研究[D];湖南师范大学;2005年

4 韩艳;中国鲎抗菌肽Tachyplesin Ⅰ原核表达及其多克隆抗体的制备[D];吉林大学;2007年

5 杨颖;小麦类脱水素基因的克隆和WZY1-1抗体的制备[D];西北农林科技大学;2007年

6 付义亮;蛋白质酪氨酸磷酸酶MEG2的纯化表征及其多克隆抗体的制备[D];吉林大学;2008年

7 曹志翔;拟南芥AtPLC5特异性抗体的制备及启动子活性的初步分析[D];中国农业大学;2005年

8 索效军;合成草鱼生长激素特异肽抗原的研究[D];山西农业大学;2004年

9 郝婵娟;蝎昆虫毒素和几丁质酶的表达纯化及多克隆抗体制备[D];山西大学;2005年

10 张苗;家蚕SCI-SB基因克隆及其原核表达的研究[D];浙江大学;2005年

本文编号：1058713