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骨形成蛋白家族成员2、7对小鼠胚胎肝干细胞分化的体外研究

发布时间:2017-10-19 09:26

  本文关键词:骨形成蛋白家族成员2、7对小鼠胚胎肝干细胞分化的体外研究


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【摘要】:目的探讨骨形成蛋白2、7(BMP2、BMP7)对小鼠胚胎肝干细胞(HP14.5)定向诱导分化为肝细胞样细胞的影响。方法将表达BMP2、BMP7、肝细胞生长因子(HGF)和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒作为4个组分别感染HP14.5,诱导其分化,在病毒感染后的第1、4、7天通过检测荧光素酶报告基因读数,在第7天通过细胞免疫荧光染色,观察肝细胞标志物白蛋白(ALB)的表达情况;并在第4、7、10天通过PAS染色、尿素氮合成功能检测,观察诱导后HP14.5向肝细胞方向的分化成熟度。结果 BMP2组、HGF组荧光素酶读数较GFP对照组明显上升;免疫荧光染色显示,诱导7d后BMP2组、HGF组细胞质内表达肝细胞特有的ALB,而GFP对照组几乎无表达;糖原染色可见BMP2组、HGF组胞质存在紫红色颗粒,呈阳性反应;尿素合成功能检测显示BMP2组、HGF组培养液中尿素氮随时间而升高。BMP7组诱导后,细胞免疫荧光染色、荧光素酶活性、PAS染色和尿素合成检测均呈阴性或弱阳性反应。结论 BMP2具有一定的诱导HP14.5向成熟肝细胞分化的作用,并初步具备肝细胞的合成分泌功能,而BMP7对其无诱导作用。
【作者单位】: 儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室、儿科学重庆市重点实验室、重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地、重庆医科大学附属儿童医院肝胆外科;
【关键词】骨形态发生蛋白质类 胚胎肝干细胞 细胞分化 重组腺病毒
【基金】:国家自然科学基金(30973062、81172545) 重庆市自然科学基金(CSTC2012jjA10120) 重庆医科大学校际重点课题(XBZD201015)~~
【分类号】:R329.21
【正文快照】: 自Wilson等[1]在小鼠营养性肝损伤修复机制研究中提出肝内可能存在肝干细胞的假说以来,有关肝干细胞的研究受到了广泛关注。目前认为肝干细胞主要包括肝卵圆细胞[2]、小肝细胞和胚胎肝干细胞(hepatic progenitor cells,HP)。胚胎肝干细胞是肝脏生长发育、再生的重要细胞来源,

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 何忠杰;方驰华;马俊勋;杨丽萍;;肝细胞生长因子与表皮细胞生长因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞[J];解放军医学杂志;2006年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 袁恒锋;何崇儒;高金巍;徐卫东;;Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用[J];第二军医大学学报;2011年07期

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本文编号:1060310

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