幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的定点突变及其原核表达

发布时间：2017-10-21 09:28

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【摘要】：目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hsp60基因,克隆至原核表达载体pEASY-E1,重组质粒转化至E. coli BL21(DE3),对其进行测序验证,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测表达产物。结果将幽门螺杆菌hsp60基因1398、1399位点AG突变为GC,构建了突变型hsp60基因的表达载体,转化大肠埃希菌后高效表达可溶性hsp60蛋白。结论构建了突变型hsp60基因表达载体,并能表达可溶性目的蛋白,为对其功能研究奠定了基础。
【作者单位】： 滨州医学院病原生物学教研室;滨州医学院附属医院;
【关键词】： 幽门螺杆菌 热休克蛋白 定点突变 原核表达
【基金】：国家自然科学基金项目(No.81072429) 教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目(No.NCET-11-1026) 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(No.2010BSB140) 山东省高校科研发展计划项目(No.J10LF21) 烟台市科学技术发展计划项目(No.2010172)
【分类号】：R378.99
【正文快照】： 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)是一种革兰阴性、微需氧弯曲状杆菌。幽门螺杆菌感染是B型胃炎、胃和十二指肠溃疡以及胃癌的主要致病因素[1~3],1994年WHO癌症研究中心将幽门螺杆菌列为胃癌的Ⅰ类生物致癌因子。发达国家约有30%,发展中国家约有90%的人口慢性感染此病原体,但

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本文编号：1072591