黄芪甲苷单克隆抗体的制备及鉴定

发布时间：2017-10-22 03:10

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【摘要】：人工合成黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,简称AST)的免疫抗原AST-BSA(黄芪甲苷-牛血清白蛋白)和包被抗原AST-OVA(黄芪甲苷-卵清白蛋白),以AST-BSA为免疫原,分5次免疫Balb/C小鼠,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,HAT筛选,有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用间接ELISA和间接竞争ELISA(酶联免疫吸附测定)法分别检测抗体效价和特异性。结果免疫小鼠血清抗体效价达1∶27000,获得两株稳定分泌抗AST单克隆抗体的细胞株,分别命名为1D5和3D11,以3D11细胞株制备的单抗检测AST显示在0.01~1μg/mL呈线性关系,检测范围达50~300 ng/mL,制备的单抗可用于AST含量的检测。该方法有望用于AST免疫检测试剂的研制开发。
【作者单位】： 江苏大学食品与生物工程学院;江苏农牧科技职业学院;江苏大学药学院;
【关键词】： 黄芪甲苷 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定
【基金】：江苏省2012年度普通高校研究生科研创新计划(CX-LX12 0669) 江苏农牧科技职业学院2012年度院级科研重点项目(ZD201205)
【分类号】：R392
【正文快照】： 黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,简称AST)是中药黄芪药理活性的主要物质之一,为黄芪及其制剂质量鉴定的指标成分。药理研究表明:AST具有调节机体免疫力、保护组织器官、降低血糖、抗细胞凋亡和抗炎抗病毒等多方面的作用,具有非常广阔的发展前景[1]。目前检测AST的方法有高效液相色

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本文编号：1076461