大肠埃希菌外膜蛋白T水解人防御素-4作用

发布时间：2017-10-22 14:07

  本文关键词：大肠埃希菌外膜蛋白T水解人防御素-4作用

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【摘要】：目的探讨外膜蛋白T(OmpT)在大肠埃希菌CFT073致尿路感染中的作用机制。方法以人膀胱癌上皮细胞5637的cDNA为模版,扩增人防御素-4(HBD-4)基因,连接至质粒pET-28a,重组质粒经转化、诱导和纯化处理后获得His-HBD-4融合蛋白;采用琼脂糖扩散法和最小抑菌浓度方法检测HBD-4对ompT野生株、敲除株和回补株的抗菌活性,并分别观察比较ompT野生株CFT073、敲除株和回补株水解HBD-4的差异。结果通过测序鉴定及双酶切电泳证实成功构建HBD-4原核表达载体pET-28a-HBD-4,获得HBD-4体外表达菌株;HBD-4对CFT073与ompT敲除株的最小抑菌浓度不同,野生株为10μg/mL,敲除株为6μg/mL;与HBD-4共同孵育后,敲除株的生长状态受到抑制,但对野生株的影响较小。结论初步证实ompT作为毒力因子参与对人固有免疫系统成分的水解,在大肠杆菌致尿路感染的过程中发挥重要作用。
【作者单位】： 南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物系;
【关键词】： 大肠埃希菌 外膜蛋白T(OmpT) 尿路感染 防御素-(HBD-)
【基金】：国家自然科学基金(30972637) 南方医科大学公卫学院院长基金(GW201101)
【分类号】：R378
【正文快照】： 抗菌肽是一类内源性抗微生物肽,广泛分布于生物体内,具有广谱抗菌等特点,也是宿主天然免疫系统中的重要组成部分。人防御素-4(human-beta-defensin-4,HBD-4)属于阳离子抗菌肽中的一种,具有抗菌活性,主要分布于人中性粒细胞、骨髓细胞、肺和肠上皮细胞,在泌尿系统中也有一定量

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本文编号：1078673