富血小板血浆与血小板裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞增殖影响的比较

发布时间：2017-10-24 07:20

  本文关键词：富血小板血浆与血小板裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞增殖影响的比较

  更多相关文章： 骨髓间充质干细胞 富血小板血浆 血小板裂解液 组织工程 细胞周期 细胞增殖

【摘要】：目的通过对比分析富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)与血小板裂解液(platelet lysate,PL)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生长增殖、细胞周期的作用,探讨二者对大鼠BMSCs生长增殖的影响。方法取20只4周龄SD大鼠,采用全骨髓分离培养法扩增传代BMSCs,并采用流式细胞仪鉴定;另取30只12周龄SD大鼠心内采血,梯度离心法获得PRP,采用3次离心结合反复冻融法制备PL。取生长状态良好的第3代BMSCs进行实验,根据培养基成分不同将实验分为7组,普通完全培养基组(A组)、1%PRP条件培养基组(B组)、1%PL条件培养基组(C组)、5%PRP条件培养基组(D组)、5%PL条件培养基组(E组)、10%PRP条件培养基组(F组)及10%PL条件培养基组(G组)。MTT检测BMSCs增殖情况;免疫荧光检测BMSCs中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况;流式细胞仪检测BMSCs细胞周期的变化;蛋白质印迹检测CyclinD1和p27Kip1蛋白表达。结果培养24、48、72h时,1%、5%、10%PRP与1%、5%、10%PL条件培养基组均可以促进BMSCs的增殖,并具有时间、剂量依赖性(P0.05);相同浓度的PRP与PL对BMSCs增殖作用的差异均无统计学意义(P0.05)。免疫荧光检测显示,PRP与PL均可以促进PCNA蛋白表达(P0.05),且呈剂量依赖性(P0.01)。流式细胞仪检测显示,不同浓度PRP及PL条件培养基组与普通完全培养基组比较,G0/G1期细胞比例逐渐减少,S、G2/M期细胞比例逐渐增多,增殖指数(PI)升高,差异具有统计学意义(P0.05),并呈剂量依赖性(P0.05);然而,相同浓度的PRP及PL对BMSCs细胞周期的影响相似,差异均无统计学意义(P0.05)。蛋白质印迹检测结果显示,5%PRP与5%PL能促进CyclinD1表达上调和p27Kip1表达下调。结论不同浓度PRP与PL能够通过上调CyclinD1以及抑制p27Kip1蛋白的表达,加快体外培养的大鼠BMSCs的细胞周期进程,促进BMSCs增殖,并呈现显著的时间、剂量依赖性;BMSCs增殖过程中,相同浓度PL与PRP的促增殖效果相同,PL可能代替PRP促进骨缺损修复。
【作者单位】： 河北联合大学医学实验研究中心;河北联合大学基础医学院药理学教研室;河北联合大学附属医院骨科;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 富血小板血浆 血小板裂解液 组织工程 细胞周期 细胞增殖
【基金】：唐山市科技局重点实验室建设项目(10140201A-12)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 近年来,血液系统不同成分在骨再生和修复过程中所发挥的重要作用引起越来越多的关注。已有众多研究关注凝血机制与骨再生修复之间的联系以及血小板成分对骨再生的促进作用[1-2]。创伤等原因激发了凝血机制后,被激活的血小板将释放出多种生物活性物质,如凝血因子、促血管活性因

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 Jan Henkel;Maria A.Woodruff;Devakara R.Epari;Roland Steck;Vaida Glatt;Ian C.Dickinson;Peter F.M.Choong;Michael A.Schuetz;Dietmar W.Hutmacher;;Bone Regeneration Based on Tissue Engineering Conceptions  A 21st Century Perspective[J];Bone Research;2013年03期

2 陈金伟;俞银贤;马金忠;;关节腔内注射间充质干细胞治疗骨关节炎研究进展[J];国际骨科学杂志;2013年04期

3 陈津;郭子宽;王立生;崔春萍;胡泽斌;吴朝晖;吴祖泽;;大规模间充质干细胞培养技术评估报告[J];中国医药生物技术;2013年04期

4 田发明;张柳;邢磊;范新昊;张楠;吕志伟;;辛伐他汀部分阻止尾悬吊大鼠股骨近端骨量的丢失[J];中国骨质疏松杂志;2013年12期

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 王有为;脐带间充质干细胞临床前安全性研究[D];北京协和医学院;2013年

2 解芳;构建同种异体组织工程骨及修复犬颅骨临界骨缺损的实验研究[D];北京协和医学院;2013年

3 赵晶晶;去抗原牛松质骨复合骨髓间充质干细胞重建大鼠眶骨缺损的实验研究[D];天津医科大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 林昭伟;BMP2和VEGF165在诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨再生中的作用[D];南方医科大学;2013年

2 王丽;植物花粉促干细胞增殖及辐射诱导氧化损伤的防护作用[D];哈尔滨工业大学;2012年

3 张云卿;自动捕获内皮祖细胞促进血管化的新型皮肤替代物的实验研究[D];第二军医大学;2013年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张绍伟;刘晶;韦纪英;;不同浓度富血小板血浆对体外培养骨髓间充质干细胞增殖活性的影响[J];陕西医学杂志;2009年06期

2 张洪涛;蔡道章;刘康;李青;曾毅军;;富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞成骨诱导的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年06期

3 张卫兵;洪光祥;康皓;;富血小板血浆对兔骨髓间充质干细胞增殖的作用[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年34期

4 具星爱;郭子宽;靳继德;李占全;;凝血酶活化的富血小板血浆促进人骨髓间充质干细胞增殖[J];组织工程与重建外科杂志;2010年01期

5 马信龙;孙晓雷;马剑雄;王志钢;张华峰;;富血小板血浆联合钙化诱导对骨髓间充质干细胞增殖和成骨活性的影响[J];中国中西医结合外科杂志;2010年02期

6 程文俊;金丹;赵艳;曾宪利;徐凯;江汕;裴国献;;富血小板血浆对青山羊骨髓间充质干细胞增殖分化的影响[J];中国修复重建外科杂志;2007年04期

7 张洪鑫;杨柳;段小军;;骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化研究进展[J];四川医学;2008年08期

8 羊书勇;金芳;张建设;郑维银;李晨军;朱宏卫;李焰;;富血小板血浆在组织工程骨成骨中的作用研究[J];西南国防医药;2011年05期

9 柳大烈;王竞鹏;林立新;王晋煌;陈兵;陈伯华;;真核表达载体pIRES2EGFP-Cadherin-11的构建及其在BMSCs内的表达[J];组织工程与重建外科杂志;2009年03期

10 宋会平;王志强;赵亚平;陈学英;张育敏;康悦;张康蓉;李宝兴;;血小板裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞生长的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年21期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 孙晓雷;马信龙;马剑雄;李稚君;;富血小板血浆联合钙化诱导对骨髓间充质干细胞增殖和成骨活性的影响[A];2009第十七届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2009年

2 刘昱;宋健;陈锡昌;胡成俊;刘维新;;体外“心肌环境”诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

3 覃俊君;;血管神经化组织工程骨中CGRP、NPY的表达[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

4 宫立众;夏顺中;张翼军;张红宾;史曦凯;钟大平;裴莉;张勇;;骨髓间充质干细胞中大小两群细胞的生物学特性比较[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年

5 冯凯;陈健琳;乌仁娜;徐晨;李欲航;陈虎;;骨髓间充质干细胞抑制异体T细胞反应的实验研究[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年

6 孙晓雷;马剑雄;王志刚;张华峰;马信;;富血小板血浆联合钙化诱导对骨髓间充质干细胞增殖和成骨活性的影响[A];天津市生物医学工程学会第30次学术年会暨生物医学工程前沿科学研讨会论文集[C];2010年

7 徐卫;李建勇;朱光荣;费晓明;孟丽娟;周小玉;汪承亚;;骨髓间充质干细胞体外培养的临床研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年

8 王金武;戴\戎;陈欣;郭尚春;孙辉;芮碧宇;赵炳辉;万隆;朱晓明;;双向诱导的骨髓间充质干细胞体外成骨与成血管的实验研究[A];生物材料与再生医学的现状与未来——2010年第十届上海地区医用生物材料研讨会论文摘要汇编[C];2010年

9 李静;陈宏;陈容平;张振;雷蕾;蔡德鸿;;间歇性高糖对INS-1细胞生长及细胞周期进程的影响[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年

10 刘昱;宋健;陈锡昌;胡成俊;刘维新;;5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外分化的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 齐继成;方兴未艾的蛋白质组学研究[N];中国医药报;2002年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 李海生;低氧促进人骨髓间充质干细胞增殖和分化及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

2 张伟;骨髓间充质干细胞免疫调节机制的研究[D];中国协和医科大学;2004年

3 牟大鹏;抑制消减杂交技术筛选骨髓间充质干细胞诱导分化前后差异表达基因[D];吉林大学;2007年

4 景红;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导为肾脏系膜细胞样细胞的实验研究[D];中国协和医科大学;2008年

5 黄定强;骨髓间充质干细胞定向诱导分化的实验研究[D];四川大学;2004年

6 王勃;诱导骨髓干细胞向心肌样细胞分化的研究[D];中国医科大学;2005年

7 韩立赤;张应力诱导大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的实验研究[D];四川大学;2005年

8 周竹娟;转核技术建立可增殖神经细胞系的实验研究[D];第三军医大学;2007年

9 邓全军;端粒酶永生化大鼠骨髓间充质干细胞的体内外研究[D];天津医科大学;2008年

10 邢小丽;大鼠视网膜匀浆上清液体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞实验研究[D];天津医科大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘宏志;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经前体细胞的研究[D];中国医科大学;2005年

2 董玉泉;兔骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及生物学特性研究[D];青岛大学;2006年

3 项正兵;人骨髓间充质干细胞向胆碱能神经元样细胞定向分化的实验研究[D];南昌大学;2007年

4 周雅丽;Survivin基因在骨髓间充质干细胞中的表达研究[D];兰州大学;2009年

5 王佳南;仿生电刺激在离体心肌细胞诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化中的作用[D];重庆医科大学;2009年

6 林晓斌;鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化肝干细胞的研究[D];汕头大学;2005年

7 李立;绿荧光蛋白转基因小鼠骨髓间充质干细胞诱导分化成内皮细胞的研究[D];第三军医大学;2005年

8 汪蕾;“心肌样”环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究[D];武汉大学;2005年

9 王慧君;毛囊培养上清液诱导骨髓间充质干细胞分化的初步研究[D];中国医科大学;2008年

10 王鹏;骨髓间充质干细胞的分离培养及脑脊液对骨髓间充质干细胞的影响[D];苏州大学;2009年

，

本文编号：1087679