Sartobind Q去除狂犬病疫苗Vero细胞DNA的方法研究

发布时间：2017-10-30 05:10

  本文关键词：Sartobind Q去除狂犬病疫苗Vero细胞DNA的方法研究

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【摘要】：本文对Sartobind Q离子交换层析膜与两种离子交换填料的DNA去除效果进行比较,比较这三种离子交换介质对于纯化狂犬病病毒时的抗原回收率及Vero细胞DNA残留量的效果。Sartobind Q离子交换层析膜具有大孔径的多孔结构,促使分子被快速地传送到固定化在离子交换膜表面的功能基团,从而具有很高的流速,克服了扩散限制。离子交换配体的吸附比较稳定,抗原回收率较高。我们对比了Sartobind Q离子交换层析膜与Sepharose DEAE离子交换介质、Sepharose Q离子交换介质去除Vero细胞DNA的能力,经过Sartobind Q离子交换层析膜处理的Vero细胞DNA残留量可以达到0.01-0.1 ng/ml之间,其去除DNA的能力远高于Sepharose DEAE离子交换介质与Sepharose Q离子交换介质,并且在高流速下Sartobind Q离子交换层析膜依然保持很好的抗原回收率和DNA去除率。通过试验结果表明,Sartobind Q离子交换层析膜在纯化狂犬病病毒时的流速、抗原回收率及Vero细胞DNA去除率方面均优于其他两种离子交换介质,特别对于Vero细胞DNA的去除有很好的效果,从而建立了一种快速有效去除狂犬病疫苗Vero细胞DNA的方法。
【关键词】：Vero细胞 狂犬病病毒 DNA Sartobind Q
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第1章 绪论8-16
• 1.1 狂犬病与狂犬病病毒8-9
• 1.2 狂犬病疫苗的发展9-13
• 1.2.1 神经组织疫苗9-10
• 1.2.2 禽胚疫苗10-11
• 1.2.3 细胞培养疫苗11
• 1.2.4 我国狂犬病疫苗的发展11-13
• 1.3 Vero细胞疫苗残留物质的考虑13-14
• 1.4 去除狂犬病疫苗中残留DNA的常规方法14-15
• 1.5 本论文的研究目的与意义15-16
• 第2章 材料和方法16-28
• 2.1 试验材料16-19
• 2.1.1 病毒浓缩液16
• 2.1.2 主要试剂16-17
• 2.1.3 常用溶液的配制17
• 2.1.4 Vero细胞DNA残留检测相关溶液配制17-19
• 2.1.5 主要仪器设备19
• 2.2 试验方法19-28
• 2.2.1 狂犬病病毒G蛋白含量的检测19-20
• 2.2.2 Vero细胞DNA残留检测20-23
• 2.2.3 Sepharose DEAE阴离子交换层析操作步骤23-25
• 2.2.4 Sepharose Q柱离子交换层析操作步骤25-26
• 2.2.5 Sartobind Q离子交换层析膜操作步骤26-28
• 第3章 结果及讨论28-41
• 3.1 Sepharose DEAE离子交换28-31
• 3.2 Sepharose Q柱离子交换31-35
• 3.3 Sartobind Q离子交换层析膜35-39
• 3.4 结果讨论39-40
• 3.5 结论40-41
• 第4章 展望41-43
• 4.1 Sartobind Q离子交换层析膜的再生41
• 4.2 生物反应器培养细胞的优化41-43
• 全文结论43-44
• 参考文献44-46
• 作者简介46-47
• 致谢47

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