转录因子ChREBP-α增强小鼠原代肝细胞的脂质合成能力

发布时间：2017-11-03 02:31

  本文关键词：转录因子ChREBP-α增强小鼠原代肝细胞的脂质合成能力

  更多相关文章： 脂代谢障碍 重组腺病毒 肝细胞 碳水化合物反应元件结合蛋白

【摘要】：目的构建含转录因子ChREBP-α基因的重组腺病毒载体,检测其在小鼠原代肝细胞中的表达及其对脂质合成的调节作用。方法将ChREBP-αcDNA克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV载体,与pAdEasy质粒在大肠杆菌BJ5183中同源重组,获得腺病毒载体pAd-ChREBP-α,在293A细胞中进行病毒的包装和扩增,检测病毒的滴度;将腺病毒Ad-ChREBP-α感染小鼠原代肝细胞,用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测ChREBP-α的表达,实时荧光定量PCR检测ChREBP-α靶基因LPK mRNA的表达。用核素14 C示踪法测定肝细胞的脂质合成速率。结果成功制备了ChREBP-α重组腺病毒,利用其在原代肝细胞过表达ChREBP-α,可显著上调靶基因LPK的表达,并增强肝细胞的脂质合成速率。结论成功制备了具有生物学活性、能在原代肝细胞中过表达的ChREBP-α重组腺病毒,为研究ChREBP-α的糖脂代谢调控作用奠定了基础。
【作者单位】： 第二军医大学基础部病理生理学教研室;第二军医大学长海医院内分泌科;第二军医大学长海医院普通外科;
【关键词】： 脂代谢障碍 重组腺病毒 肝细胞 碳水化合物反应元件结合蛋白
【基金】：国家杰出青年科学基金(31025013) 国家自然科学基金(81100614)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 肝脏是体内糖脂代谢的重要场所。碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response elementbinding protein,ChREBP)是调控肝脏糖脂代谢的重要转录因子之一,能够与L型丙酮酸激酶(L-typepyruvate kinase,LPK)等靶基因启动子区的碳水化合物反应元件(carbohydrate response ele

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 徐兰兰;游莉;郭元元;邹正渝;黎玉叶;孙双双;罗进勇;周兰;;人S100 A9重组腺病毒载体的构建和鉴定[J];重庆医学;2011年22期

2 ;[J];;年期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 汪琦;朱舟;王伟;;大鼠缝隙连接蛋白Connexin 43的shRNA重组腺病毒载体的构建与鉴定[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

2 郭浩;彭毅志;辛海明;;小鼠CCR7基因重组腺病毒的构建与鉴定[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年

3 樊守艳;梁平;张晓燕;;小鼠FAM3C基因重组腺病毒载体的构建与鉴定[A];中南地区第八届生理学学术大会论文摘要汇编[C];2012年

4 庞小娟;赵晓琴;彭薇;臧宇辉;陈芳芳;罗冰;虞伟;秦浚川;李晓军;;分化抑制因子3重组腺病毒载体的构建及鉴定[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年

5 郭浩;彭毅志;辛海明;;小鼠CCR7基因重组腺病毒的构建与鉴定[A];第八届西南五省一市烧伤整形学术会议暨贵州省医学会烧伤整形分会2010年学术年会论文汇编[C];2010年

6 辛海明;彭毅志;郭浩;袁志强;;小鼠CCR7腺病毒体外转染对未成熟树突状细胞的影响[A];第八届西南五省一市烧伤整形学术会议暨贵州省医学会烧伤整形分会2010年学术年会论文汇编[C];2010年

7 张睿娟;杨林花;周剑峰;;类果蝇分节因子4反义腺病毒载体的构建和鉴定[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

8 郭景茹;杨焕民;计红;臧琳;郭爽;王忠伟;张旭;;Wistar大鼠HSP70基因重组腺病毒载体的构建及其病毒制备[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年

9 陆才生;马会慧;魏秋静;古洁若;;CTLA4Ig基因重组腺病毒载体的构建及其功能测定[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年

10 梁绍燕;金先庆;罗庆;;结缔组织生长因子的克隆及其重组腺病毒的构建[A];中国西南地区第九届小儿科学术会议论文汇编[C];2008年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 夏天;重组腺病毒AdCD40Ig联合供体静息B淋巴细胞预处理诱导小鼠皮肤移植耐受的研究[D];四川大学;2004年

2 董磊;以前列腺干细胞抗原为靶点的重组蛋白及重组腺病毒载体疫苗的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年

3 葛良鹏;提高腺病毒对猪皮肤组织转染效率的研究[D];第三军医大学;2008年

4 詹鹰;构建siRNA抑制阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5基因表达治疗ED的研究[D];华中科技大学;2007年

5 曹慧青;共表达CD/TK双自杀基因对血管平滑肌细胞增殖的影响[D];中国协和医科大学;2001年

6 谭灿;hCUL4A过表达对缺氧/缺血—再供氧/再灌注损伤的保护作用及机制初探[D];中南大学;2012年

7 马春玲;SARS-CoV N蛋白免疫原性和致病性的初步研究[D];南京医科大学;2006年

8 樊彩斌;IKK2dn转染并负载供体抗原的受体未成熟树突状细胞诱导免疫耐受的实验研究[D];苏州大学;2008年

9 余资江;noggin基因修饰神经干细胞移植治疗衰老模型小鼠的实验研究[D];第三军医大学;2006年

10 郭建强;H5N1亚型流感病毒双基因共表达的DNA疫苗及腺病毒载体疫苗的研究[D];中国疾病预防控制中心;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 邱俊钦;人骨形态蛋白-2基因重组腺病毒载体的构建及修饰骨髓间充质干细胞的实验研究[D];福建医科大学;2011年

2 周建民;人SCL基因重组腺病毒表达载体的构建[D];石河子大学;2011年

3 邱敏;力生长因子对成骨细胞生理调控作用的研究[D];重庆大学;2010年

4 代婷婷;大鼠Foxo3a基因的克隆及其重组腺病毒载体的构建[D];南方医科大学;2010年

5 刘瑜;CXCR4-siRNA重组腺病毒载体的构建及其沉默CXCR4基因的体外研究[D];重庆医科大学;2012年

6 陈水木;结核分枝杆菌MPT83重组腺病毒载体的构建及表达[D];西南大学;2008年

7 迟建光;Ad-BDNF转染体外培养乳鼠雪旺细胞的相关实验研究[D];山东中医药大学;2008年

8 李伟;鼠重组IL-12腺病毒经脂质体包埋转染Kupffer细胞的实验研究[D];苏州大学;2006年

9 郭浩;小鼠CCR7重组腺病毒转染未成熟树突状细胞的实验研究[D];第三军医大学;2008年

10 钟声;携带人VEGF121和BMP2双基因重组腺病毒载体构建、鉴定及其转染HEK293A细胞[D];辽宁医学院;2011年

，

本文编号：1134281