miR-125b通过靶向抑制Smad4调控骨髓间充质干细胞成骨分化

发布时间：2017-11-04 12:32

  本文关键词：miR-125b通过靶向抑制Smad4调控骨髓间充质干细胞成骨分化

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【摘要】：目的:研究miR-125b是否通过调控其预测的靶基因Smad4表达而调节骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化。方法:构建Smad4 3'-UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-125b对Smad4 3'-UTR-荧光素酶活性的影响;分离培养人骨髓MSCs,在MSCs中转染miR-125b mimics并进行成骨诱导,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹检测Smad4表达水平;Smad4 siRNA转染MSCs并进行成骨诱导,通过检测碱性磷酸酶(AKP)活性及RUNX2 mRNA表达水平变化考察Smad4下调对MSCs成骨分化的影响。结果:双荧光素报告检测显示miR-125b能特异性地与Smad4 mRNA的3'-UTR结合,抑制其荧光素酶活性(P0.05)。过表达miR-125b能抑制MSCs成骨分化过程中Smad4表达水平。干扰Smad4表达能抑制AKP活性及RUNX2 mRNA表达水平,它能部分模拟miR-125b调控MSCs成骨分化的功能。结论:miR-125b通过抑制靶基因Smad4的表达调控MSCs成骨分化。
【作者单位】： 南华大学附属南华医院骨科;广州医学院附属肿瘤医院肿瘤研究所;
【基金】：国家自然科学基金(81101526)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： m i R N A s是近十年来发现的一类具有调控功能的19~25个核苷酸组成的非编码小分子RNA。成熟miRNA与靶基因mRNA的3'-UTR结合抑制靶m R N A的翻译或降解靶m R N A,从而实现基因表达的转录后调控[1]。miRNAs参与生命活动过程中一系列的重要进程,包括生长发育、细胞增殖、分化、

【参考文献】

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