稀有密码子对人源Id2基因表达的影响

发布时间：2017-11-11 14:31

  本文关键词：稀有密码子对人源Id2基因表达的影响

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【摘要】：目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化。结果:正确构建了Id2基因的基因突变表达质粒,基因突变表达的Id2蛋白在E.coli BL21中为可溶性上清表达,成功纯化了目的蛋白,且分子筛结果显示其在溶液中呈现二聚体状态。结论:稀有密码子对Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表达有重要影响。
【作者单位】： 重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室;重庆医科大学附属第二医院检验科;重庆医科大学附属第一医院心内科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:30970563)
【分类号】：R341;Q78
【正文快照】： 分化抑制因子(inhibitor of DNA binding and/ordifferentiation,Id)属于核转录因子helix-loop-helix(HLH)家族[1]。HLH蛋白质家族可通过2个螺旋互相作用形成二聚体,进而调控目的基因表达。HLH蛋白可分为3类:①bHLH蛋白;②bHLH-zip蛋白;③dnHLH蛋白[2]。bHLH蛋白的N端有一段碱

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本文编号：1171806