干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响

发布时间：2017-11-15 10:04

  本文关键词：干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响

  更多相关文章： NaV. RAW. 增殖 吞噬能力 迁移能力

【摘要】：目的应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响。方法通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株。用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能。结果成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80%。CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降(P0.05);流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低(P0.05);Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱(P0.05)。结论建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低。
【作者单位】： 天津医科大学研究生院;武警后勤学院附属医院心血管病研究所心脏中心;武警后勤学院附属医院呼吸与重症医学科;
【基金】：国家自然科学基金(81070121,81170238) 天津市自然科学基金(09ZCZDSF04200,11JCYBJC12000)
【分类号】：R363
【正文快照】： 巨噬细胞是免疫系统的重要组成部分,参与先天性和后天性免疫反应。巨噬细胞具有异质性,按照细胞表型和功能可为:经典型(具有促进炎症的表型,酶解、吞噬、迁移能力较强)和非经典型(具有抑制炎症的表型,能够分泌多种细胞因子,促进组织新生和炎症消退),在生理、病理过程的不同阶

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本文编号：1189319