利用SUMO表达系统高效可溶表达人白细胞介素15及其活性研究

发布时间：2017-11-21 18:29

  本文关键词：利用SUMO表达系统高效可溶表达人白细胞介素15及其活性研究

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【摘要】：目的:探讨重组人白细胞介素15(rhIL-15)的表达条件、纯化工艺并进行生物活性鉴定。方法:采用RT-PCR方法从正常成人外周血淋巴细胞中扩增出人白细胞介素15(hIL-15)cDNA,克隆到pSUMO Vector中,构建rpSUMOhIL-15重组质粒。将转化重组质粒的工程菌诱导表达,超声破碎后取菌液上清,经过亲和层析、酶切、亲和层析得到成熟蛋白。高效液相色谱进行纯度分析;利用rhIL-15促进T细胞增殖、rhIL-15诱生的NK细胞杀伤肿瘤细胞的能力鉴定其生物活性;荷瘤鼠实验研究rhIL-15抗肿瘤作用。结果:经纯化后得到rhIL-15,其分子量大小为14.4 kD,蛋白纯度在95%以上,具有显著刺激T细胞增殖和NK细胞杀伤肿瘤细胞效果。动物实验结果显示其具有明显的抗肿瘤作用。结论:经过纯化获得高纯度和高生物学活性的rhIL-15,且具有明显增强NK细胞杀伤、刺激T细胞增殖和抗肿瘤的活性,为细胞因子联合其他方法治疗肿瘤等疾病提供了实验基础。
【作者单位】： 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室;
【分类号】：R392
【正文快照】： 白细胞介素15(IL-15)是1994年Grabstein等[1]发现的一种新的细胞因子,可由活化的单核-巨噬细胞、表皮细胞和成纤维细胞等多种细胞产生[2]。IL-15前体分子由162个氨基酸组成,先导序列较长为48个氨基酸残基,成熟分子114个氨基酸残基,分子量14～15 kD。IL-15具有类似IL-2的结构

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本文编号：1211896