ICAM-1编码基因对乙型脑炎DNA疫苗树突状细胞功能的影响

发布时间：2017-11-24 01:13

  本文关键词：ICAM-1编码基因对乙型脑炎DNA疫苗树突状细胞功能的影响

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【摘要】：目的:研究细胞间粘附分子1(ICAM-1)编码基因对日本脑炎(JE)DNA疫苗脾脏树突状细胞功能的影响。方法:套式RT-PCR法获取BALB/c鼠ICAM-1编码基因,构建重组子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂质体法转染上述质粒于CHO细胞,Western blot法检测转染的CHO细胞中目的蛋白表达。实验分5组,包括:pJME/ICAM-1、pJME+PICAM-1、pJME、JE灭活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫组,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,流式细胞仪检测经不同免疫原免疫鼠后脾脏DC表型、抗原吞噬功能以及混合淋巴细胞反应。结果:融合表达重组质粒pJME/ICAM-1和单质粒pICAM-1经鉴定构建正确。pJME/ICAM-1组CD11c+CD86+DC和CD11c+ICAM-1+DC比例分别为(6.92±1.40)%、(7.18±0.57)%,高于其它免疫组(均P0.05);pJME/ICAM-1和pJME+pICAM-1组DC表面CD80和MHCⅡ表达水平比较差异无统计学意义(P0.05);pJME/ICAM-1与pJME+pICAM-1组内吞能力明显增强,平均荧光强度分别为437.11±47.60、416.67±29.12,显著高于其它组(P0.05)。比较不同免疫原对细胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1组最强,(73.69±7.32)%CD4+T细胞发生分裂,(45.40±2.57)%CD8+T细胞发生分裂,显著高于对照组(P0.05)。结论:ICAM-1编码基因能够促进JE DNA疫苗脾脏树突状细胞的成熟,能够提供独立或放大B7分子的协同刺激信号。
【作者单位】： 中国医科大学附属盛京医院感染科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30471547) 辽宁省自然科学基金资助项目(20042072) 辽宁省教育厅基础研究计划资助项目(05L498) 辽宁省教育厅高校科研基金资助项目(L2010589)
【分类号】：R392.4
【正文快照】： 日本脑炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗诱导的细胞免疫和体液免疫仍达不到预期效果,一系列措施用来增强JE DNA疫苗的免疫效果[1]。目前越来越多的研究表明,树突状细胞(Dendriticcells,DCs)是DNA疫苗免疫应答的中心环节,质粒DNA可直接转染注射部位抗原提呈细胞,质粒DNA直

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本文编号：1220485