刚地弓形虫ROP11基因的克隆及生物信息学分析

发布时间：2017-12-01 21:20

  本文关键词：刚地弓形虫ROP11基因的克隆及生物信息学分析

  更多相关文章： 刚地弓形虫 棒状体蛋白 原核表达 生物信息学分析

【摘要】：提取刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子总RNA,根据棒状体蛋白11(ROP11)全长编码序列(登录号为DQ077905)的开放阅读框设计引物并进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增,PCR产物经EcoRⅠ和NotⅠ酶切后与原核表达载体pGEX-6P-2连接,重组质粒转化大肠埃希菌(E.coli)XL-Blue,阳性菌落经PCR和双酶切鉴定,并测序。对所得序列进行生物信息学分析。结果显示,RT-PCR扩增产物约为1 500 bp。菌落PCR及双酶切结果正确。测序结果显示,获得的ROP11基因片段为1 548 bp(登录号为KC456639),与GenBank上已有的弓形虫ROP11序列相比,序列一致性为99%。生物信息学分析发现,ROP11编码蛋白质的预期相对分子质量为Mr57 020,包括有12个保守结构区域,其前26个氨基酸残基构成信号肽,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化区域位于170~511氨基酸,且有2个潜在的N-糖基化位点。
【作者单位】： 河北北方学院病原生物与免疫学研究所;
【基金】：河北省高等学校科学技术研究重点项目(No.ZH2012010)~~
【分类号】：R382.5
【正文快照】： 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性有核细胞内寄生原虫,呈世界性分布,可感染包括人在内的哺乳动物、鸟类和爬行类等,引起弓形虫病。弓形虫可寄生在人体多个脏器和组织,多数感染者无临床症状,免疫力低下者可有严重的临床症状[1-3]。弓形虫棒状体蛋白(ROP)由虫体前端的分

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张颖;张进顺;贾晓辉;贾天军;卢致民;周芳;;刚地弓形虫强毒株棒状蛋白ROP18的克隆、表达和免疫反应性分析[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2012年06期

2 赵焕阁;王华;黄用豪;周松林;郭峻莉;黄凤迎;林映莹;谭光宏;;弓形虫ROP5基因真核表达载体的构建及其免疫保护性的研究[J];中国人兽共患病学报;2012年09期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄翠琴;陈永锋;王寿昆;郑新添;李海丽;;应用特异PCR方法诊断2例猪弓形虫病[J];安徽农业科学;2012年15期

2 陈长亮;毛以智;;遵义市猪弓形虫病的血清学调查[J];贵州畜牧兽医;2012年05期

3 曲道峰;韩剑众;杜爱芳;;刚地弓形虫Rop18基因的原核表达及鉴定[J];中国畜牧兽医;2013年10期

4 韩建强;孙秀涛;李兵;段纲;邹丰才;;云南省玉溪市猪弓形虫病血清学调查[J];黑龙江畜牧兽医;2011年07期

5 张东林;惠煜;周艳琴;王玉海;董海岚;王正松;赵俊龙;;应用细胞培养方法分离猪源弓形虫虫株[J];河南农业科学;2009年03期

6 王海燕;马广鹏;任庆娥;姚雷;宁长申;张龙现;;猪弓形虫病PCR诊断方法的建立[J];河南农业大学学报;2008年05期

7 颜友荣;陈琳;戴丽红;;猪弓形虫病的中西药结合治疗效果[J];江苏农业科学;2012年07期

8 徐安健;赵高潮;乌姗娜;靳庆娥;谷俊朝;;弓形虫毒力因子的研究进展[J];中国热带医学;2013年11期

9 薛峰;黄敏君;洪彩玲;杨英超;甘绍伯;谷俊朝;;弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定[J];中国热带医学;2014年03期

10 翁亚彪,谢德华,林瑞庆,李华文,张德林,吴绍强,朱兴全;弓形虫ITS及5.8S序列的PCR扩增、克隆及分析[J];畜牧兽医学报;2005年01期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 王海燕;马广鹏;任庆娥;菅复春;周洋;宁长申;张龙现;;河南省部分地区猪弓形虫感染调查及猪源虫株对小鼠的接种试验[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 余莉;利用RNA干扰技术双通道抑制弓形虫嘌呤补救合成途径[D];安徽医科大学;2008年

2 陶青;猪弓形虫体内诱导抗原的鉴定及功能分析[D];华中农业大学;2013年

3 孙晓敬;弓形虫感染的血清流行病学调查及部分抗原的免疫学研究[D];吉林大学;2013年

4 贾博寅;感染弓形虫宿主的转录组及标识性microRNAs的研究[D];吉林大学;2014年

5 张念章;弓形虫CDPKs核酸疫苗及重组亚单位疫苗的免疫保护性研究[D];中国农业科学院;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 鲁陈;实时荧光定量PCR检测法在孕妇弓形虫感染检测中的优势及临床应用[D];南昌大学;2010年

2 王萌;应用LAMP检测弓形虫感染的研究[D];中国农业科学院;2011年

3 吴春凤;弓形虫GRA1基因真核表达载体的构建及其DNA与cDNA序列的比较[D];吉林大学;2004年

4 陈志强;弓形虫SAG2基因的测序、检测及表达[D];湖南农业大学;2007年

5 王海燕;河南省部分地区猪弓形虫病流行病学调查及分离株基因型鉴定[D];河南农业大学;2007年

6 陈杰;上海市宠物犬、猫的弓形虫病流行病学研[D];上海交通大学;2010年

7 沈博;我国部分地区鸡群弓形虫感染情况调查[D];南京农业大学;2010年

8 吴坤;弓形虫1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶（DXR）基因的克隆、表达及生化特性研究[D];南京农业大学;2010年

9 常乐;犬新孢子虫NCLIV_019770蛋白抗新孢子虫与弓形虫交叉保护效果的研究[D];吉林大学;2013年

10 黄娟娟;先天性心脏病发生相关因素研究[D];郑州大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 乔军;杨松涛;夏咸柱;冯娜;戈锐;;弓形虫虎源分离株ROP10基因的克隆、序列分析及其表达研究[J];寄生虫与医学昆虫学报;2008年02期

2 蒋蔚;王权;陈永军;聂福旭;;弓形虫上海株的棒状体蛋白ROP2的克隆表达及纯化[J];生物技术通报;2010年01期

3 刘苗苗;周鹏;朱兴全;;弓形虫棒状体蛋白的研究进展[J];中国兽医科学;2008年05期

4 孟晓丽;殷国荣;刘红丽;石蓉;张宇斌;马秀瑞;;不同剂量STAg滴鼻免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用[J];中国人兽共患病学报;2006年03期

5 刘转转;王海龙;殷国荣;马广源;张建中;凡振伟;;刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析[J];中国人兽共患病学报;2009年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈盛霞;猪感染刚地弓形虫的抗体水平与所分离虫体的致病性间的关系[J];国外医学.寄生虫病分册;1994年05期

2 孙新;刚地弓形虫悬浮和粘附细胞培养的比较研究[J];蚌埠医学院学报;1995年01期

3 翁少鹏;刚地弓形虫微孔的内噬作用[J];国外医学.寄生虫病分册;1995年01期

4 刘霞 ,沈大康;刚地弓形虫三毒力株的生长特性[J];国外医学.寄生虫病分册;1998年03期

5 毛佐华;刚地弓形虫肌动蛋白解聚因子的克隆及特性[J];国外医学.寄生虫病分册;1998年03期

6 张爱民,张亚莉,李军;VB环境下刚地弓形虫多媒体课件的开发[J];同济大学学报(医学版);2001年05期

7 张晓丽;刚地弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)的蛋白组成及免疫化学特性[J];国外医学.寄生虫病分册;2002年01期

8 王琴美;;慢性刚地弓形虫感染小鼠的脑氨肽酶活力[J];国际医学寄生虫病杂志;1990年01期

9 徐大为;刚地弓形虫的嘧啶补救途径[J];国际医学寄生虫病杂志;1993年05期

10 刘汉钧，钱纬，韩丹，，黎冠群，危群;人弓形虫淋巴结炎－例报告[J];昆明医学院学报;1994年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 文洁;白慕群;卢戌;;应用单克隆抗体测定人弓形虫IgM抗体的研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

2 刘丽丽;;概述弓形虫病及其研究进展[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年

3 张理航;刘茂军;吕芳;李贺侠;吴叙苏;冯志新;邵国青;;刚地弓形虫NT株P30基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年

4 杨翠萍;万红娇;宋贤响;刘金花;;自拟弓形虫汤对急性弓形虫RH株感染小鼠脾细胞IL-2影响的实验研究[A];第三届全国中医药免疫学术研讨会论文汇编[C];2006年

5 江涛;周艳琴;刘琴;聂浩;姚宝安;赵俊龙;;弓形虫ROP2基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年

6 张燕丽;曹丽艳;芦峗;蔡志杰;王艳华;付宝权;李文卉;张德林;;弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年

7 江涛;赵俊龙;姚宝安;王金苹;周艳琴;刘琴;付媛;;弓形虫ROP2和MIC3基因的扩增、克隆及表达质粒的构建[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年

8 魏庆宽;张佃波;李瑾;傅婷霞;柏雪莲;崔勇;王洪法;付斌;刘玉冰;宰德福;黄炳成;刘克义;韩广东;;抗弓形虫感染DNA疫苗的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

9 张理航;邵国青;刘茂军;吕芳;李贺侠;吴叙苏;冯志新;;刚地弓形虫NT株P30基因的克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年

10 魏庆宽;李瑾;傅婷霞;柏雪莲;崔勇;王用斌;张佃波;王洪法;付斌;刘玉冰;宰德福;黄炳成;刘克义;韩广东;;抗弓形虫感染DNA疫苗的研究[A];山东预防医学会第二届学术年会论文汇编[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 梅琳达·温纳 韩彦文 译;谁是精神病的罪魁祸首[N];卫生与生活报;2010年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 高剑;刚地弓形虫诱导小鼠结肠癌ct26细胞周期阻滞及相关的抗癌作用[D];重庆医科大学;2011年

2 陈盛霞;弓形虫速殖子体外培养及银杏酸等对其增殖抑制作用的研究[D];江苏大学;2008年

3 张东林;弓形虫病分子诊断方法及弓形虫分离株耐药性的研究[D];华中农业大学;2008年

4 张加勤;弓形虫LDH2基因启动子的克隆及初步鉴定[D];山东大学;2008年

5 周晓红;弓形虫MAG和tSAG1在转基因番茄中的表达研究[D];第一军医大学;2004年

6 司进;弓形虫病免疫诊断及靶向生物治疗的研究[D];南京医科大学;2005年

7 方瑞;弓形虫自杀性DNA疫苗及重组杆状病毒疫苗研究[D];华中农业大学;2010年

8 付永锋;抗刚地弓形虫特异性人源抗体Fab片段的制备和研究[D];复旦大学;2008年

9 谭峰;弓形虫核苷三磷酸脱氢酶功能分析及疫苗候选靶标的研究[D];南方医科大学;2011年

10 江涛;猪弓形虫病分子诊断方法的建立与基因免疫研究[D];华中农业大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王尚尚;两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究[D];扬州大学;2012年

2 王芬;刚地弓形虫磷酸甘油酸变位酶2基因的生物信息学分析、克隆表达及免疫保护性研究[D];山西医科大学;2011年

3 孔t

本文编号：1242509