刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达

发布时间：2017-12-04 14:11

  本文关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达

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【摘要】：目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
【作者单位】： 首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所;热带病防治研究北京市重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(No.81071375,81301404) 北京市自然科学基金项目(No.7132042) 首都医科大学基础-临床科研合作基金项目(No.13JL16) 首都医科大学附属北京友谊医院科研启动基金项目(No.2011_30yykyqd)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种细胞内寄生原虫,可引起人兽共患弓形虫病。人类对弓形虫普遍易感,我国人群感染率为4.0%~9.0%,孕妇感染率高达6.6%~32.9%[1]。孕妇感染弓形虫可以引起胎儿严重的先天感染,导致流产、死胎、畸形、智力障碍。对于免疫力低下者,如器官移植或AI

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本文编号：1251260