结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的基因克隆及生物信息学分析

发布时间：2017-12-04 14:24

  本文关键词：结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的基因克隆及生物信息学分析

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【摘要】：目的构建结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3原核表达载体,获得Hsp16.3蛋白,并应用生物信息学软件,分析结核分枝杆菌小分子热休克蛋白16.3(Hsp16.3)的多种蛋白质性质,以及获取该基因的相关信息。方法以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增Hsp16.3基因,PET28a为载体,构建重组质粒PET28a-Hsp16.3并表达,利用Pmtparam、Protseale、HMMTOP、TMHMM、GOR4、ProtFun等软件预测和分析结核分枝杆菌小分子热休克蛋白16.3的氨基酸组成、理论等电点、结构域、活性位点、疏水性、跨膜区、糖基化位点、磷酸化位点、二级结构及系统进化分析。结果成功构建了Hsp16.3原核表达载体PET28a-Hsp16.3,并在宿主菌BL21(DE3)中表达。推测结核分枝杆菌小分子热休克蛋白16.3白分子式为C716H1131N197O225S4,分子量为16227.2,理论等电点为5.00。该蛋白氨基酸序列中含有α-螺旋(Alpha helix)46处,延伸链(Extended strand)25处,无规则卷曲(Random coil)73处及5个磷酸化位点;4个O-糖基化位点;1个前肽裂解预测位点。结论 Hsp16.3基因克隆入宿主菌中并成功表达;该蛋白推测是一个亲水性不稳定蛋白,无跨膜区,可能参与重要的能量代谢及免疫反应。
【作者单位】： 石河子大学医学院病理生理学教研室(石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室);
【基金】：国家自然科学基金(No:81160192,30960355) 石河子大学科学技术研究发展计划“自然科学与计划创新”重点项目(No:ZRKX2010ZD01)
【分类号】：R378
【正文快照】： 结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种世界性传染病,也是单一致病菌感染导致死亡率最高的感染性疾病,又称为痨病和“白色瘟疫”。自有人类以来就有结核病,他是一种古老的传染病[1]。近年来随着人口流动增加、HIV与结核分枝杆

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本文编号：1251309