HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达
本文关键词:HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达
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【摘要】:目的探讨HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的作用机制,从而为进一步研究其在造血发育中的功能奠定基础。方法提取斑马鱼总RNA,利用RT-PCR克隆得到HOXC4基因片段,将克隆得到的基因片段和载体pCS2+用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,把基因片段插入pCS2+中,重组质粒经双酶切及测序鉴定后,采用T3RNA聚合酶体外转录体系制备地高辛标记的HOXC4基因反义mRNA探针,然后行全胚胎原位杂交。结果构建HOXC4-pCS2+重组质粒,获得地高辛标记的反义mRNA探针并且完成其在野生型斑马鱼中的全胚胎原位杂交,显示HOXC4基因在Tuebingen野生型斑马鱼神经系统高表达。结论得到HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的基本表达情况,为进一步研究该基因在造血发育过程中的功能奠定了基础。
【作者单位】: 贵阳医学院儿科教研室;贵阳医学院组织工程与干细胞实验中心;贵阳医学院免疫学教研室;
【基金】:国家自然科学基金(No.30960412) 贵州省科技基础条件平台项目(No.[2009]4005) 贵州省优秀科技教育人才省长专项资金(No.S2008-4)资助
【分类号】:R-331
【正文快照】: 同源盒(homeobox,HOX)基因,最初是在果蝇中发现,具有同源结构域,包含高度保守的180bp的序列,编码60个氨基酸,对胚胎的发育具有重要的调节作用[1]。其中一些同源盒基因作为重要的转录因子,是转录的激活剂或抑制剂。爪蟾的HOX基因调控胚胎期的发育,影响其原始造血祖细胞的分化[2
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