日本血吸虫T2核酸酶的原核表达及活性分析
本文关键词:日本血吸虫T2核酸酶的原核表达及活性分析
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【摘要】:目的构建日本血吸虫T2核酸酶表达载体,并进行体外表达和酶活性分析。方法从日本血吸虫基因组数据库中找到与曼氏血吸虫虫卵抗原Omega-1同源性最高的蛋白AY814845,设计引物并通过PCR技术扩增得到该基因,将其成熟编码区连入pET32a表达载体,转化大肠杆菌并用IPTG诱导其表达,最后对表达产物的核酸酶活性进行分析。结果成功的构建了日本血吸虫T2核酸酶的表达载体,其编码区能够在大肠杆菌中表达,且表达产物具有一定的核酸酶活性。结论从体外扩增了日本血吸虫T2核酸酶AY814845,明确其表达产物具有核酸酶活性,为今后深入研究该蛋白的功能打下了基础。
【作者单位】: 南通大学医学院病原生物学系;
【基金】:国家自然科学基金项目(81171589,31100112) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)联合资助~~
【分类号】:R383.2
【正文快照】: T2核酸酶是一类底物非特异性的酸性核酸酶,广泛分布于微生物、植物和哺乳动物中,往往作为分泌蛋白分泌到细胞外[1]。它们功能丰富,参与多种细胞生命活动[2-5]。在我国,日本血吸虫对人体最重要的危害是虫卵引起的肉芽肿及继发的肝纤维化[6]。而肝纤维化 的发生过程,与Th1/Th2
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,本文编号:1275143
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