免疫瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白对SD大鼠脂肪沉积的影响

发布时间：2017-12-16 21:21

  本文关键词：免疫瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白对SD大鼠脂肪沉积的影响

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【摘要】：目的原核表达瘦素受体(OBR)近跨膜区重组融合蛋白并进行SD大鼠免疫实验,观察其对SD大鼠脂肪沉积的影响。方法设计1对带有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点特异性引物,扩增OBR胞外近跨膜区基因片段(1705~2364 bp),经酶切后连接到表达载体pRSETA的BamHⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,构建OBR胞外近跨膜区重组表达质粒并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳分析和western blotting鉴定表达产物。随后制备OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白并免疫SD大鼠,观察其对SD大鼠体质量、采食量、体长、Lee's指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积、皮下脂肪沉积的影响。结果 SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定结果显示,在IPTG诱导下OBR胞外近跨膜区重组表达菌表达了相对分子质量27 600左右的融合蛋白。对SD大鼠免疫OBR胞外近跨膜区重组融合蛋白后,体质量、体长、Lee's指数、腹脂率、肝脏脂肪沉积与对照组无明显差异,而采食量显著增加、皮下脂肪细胞体积减小。结论成功表达西藏小型猪瘦素受体胞外近跨膜区重组融合蛋白,免疫SD大鼠可促进采食和抑制皮下脂肪沉积。
【作者单位】： 南方医科大学实验动物中心暨比较医学研究所;东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司;华南农业大学动物科学学院;
【基金】：国家973计划(2011CBA01006) 863项目(2011AA100304-1) 广东省科技计划项目(2009B060300009,2010A011200003,2010A030400001,2011B060300028,2010B060500001) 广州市科技计划(2010U1-E021) 广州市重大科技专项(2010U1-E00811-3)~~
【分类号】：R-332
【正文快照】： 随着人们生活水平的提高和饮食结构的变化,目前肥胖在全世界呈流行趋势[1]。肥胖既是一种独立的疾病,又可能诱发糖尿病、脂肪肝、高血压、中风和多种癌症等疾病[1-3]。有研究发现瘦素及瘦素受体(OBR)功能异常、瘦素抵抗是导致部分人肥胖的原因。瘦素是由脂肪组织合成的一种重

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本文编号：1297512