抗HPV L1小鼠单克隆抗体及兔多克隆抗体的制备

发布时间：2017-12-17 02:03

  本文关键词：抗HPV L1小鼠单克隆抗体及兔多克隆抗体的制备

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【摘要】：目的用人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)C-末端保守序列多肽制备抗HPV L1单克隆及多克隆抗体,并对所制备的抗体的检测能力进行鉴定,同时比较其与购买的单克隆抗体的检测能力。方法将HPV L1 C-末端一段30个氨基酸长度的保守序列多肽与载体蛋白KLH偶联,免疫小鼠及兔,制备抗多肽单克隆及多克隆抗体。分别采用ELISA、Western blot、免疫组织化学等方法检测所制备的多肽抗体多种型别HPV L1的反应性,并与市售的多价抗HPV L1单克隆抗体进行比较,以确定多肽抗体的检测能力。结果免疫小鼠及兔后得到的鼠单克隆抗体及兔多克隆抗体,其效价分别在1∶320 000以上及1∶64 000以上;用ELISA方法检测3种抗体对HPV阳性细胞提取蛋白及L1重组蛋白的反应性,均有阳性反应;用Western blot方法检测抗体对HPV阳性细胞提取蛋白及L1重组蛋白的反应性,均出现明显条带,但我们制备的鼠单克隆抗体与细胞提取蛋白未见明显条带;用免疫组织化学方法检测HPV阳性细胞,3种抗体均呈现阳性反应。结论 HPV L1 C-末端保守序列可以诱导产生抗HPV L1单克隆或多克隆抗体,可以检测出多型别的HPV L1,其检测能力与市售的多价抗HPV L1单克隆抗体基本相当。
【作者单位】： 三峡大学医学院;三峡大学第二临床医学院妇产科;三峡大学第一临床医学院妇产科;
【基金】：国家自然科学基金(30770104) 湖北省自然科学基金(2011CDC002)
【分类号】：R392
【正文快照】： 宫颈癌是导致女性死亡的第3大原因[1]。估计全球宫颈癌患病率为11.7%,85%的宫颈癌发生在发展中国家。HPV感染在宫颈癌病变的发展中起着决定性的作用[2-3],其中高危型HPV尤其是HPV16、18与宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelialneoplasia,CIN)发生的相关性最为

【参考文献】

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【共引文献】

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【相似文献】

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本文编号：1298298