整合素阻断剂AP25单克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2017-12-18 13:20

  本文关键词：整合素阻断剂AP25单克隆抗体的制备与鉴定

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【摘要】：目的制备整合素阻断剂AP25的单克隆抗体,鉴定其效价和特异性。方法从抗原免疫BALB/c小鼠分离免疫脾细胞,通过杂交瘤技术将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株并进行扩大培养。采用小鼠体内诱生法制备腹水,进行纯化后得到抗AP25单克隆抗体,用ELISA和Western blot鉴定其效价和特异性。结果 ELISA检测抗AP25单克隆抗体效价可达1∶2×106,Western blot鉴定抗体特异性良好。结论获得了能够高表达抗AP25单克隆抗体的杂交瘤细胞株;腹水制备抗体,纯化后得到效价高、特异性良好的AP25单克隆抗体。
【作者单位】： 中国药科大学生命科学与技术学院;
【基金】：国家高技术研究发展计划“863”项目(SQ2011SF11B02030)
【分类号】：R392
【正文快照】： 整合素蛋白是一类细胞黏附分子,在肿瘤新生血管生成过程中发挥重要作用,已成为肿瘤研究中的靶标分子之一[1-3]。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列是细胞外基质与整合素受体黏附的通用识别位点[4-6],因此该序列被用于发展不同的整合素阻断剂。整合素阻断剂AP25是本实验室设计

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