细粒棘球蚴转化生长因子βⅠ型受体胞内域原核表达载体的构建及蛋白纯化

发布时间：2017-12-19 12:03

  本文关键词：细粒棘球蚴转化生长因子βⅠ型受体胞内域原核表达载体的构建及蛋白纯化　出处：《中国病原生物学杂志》2013年12期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)转化生长因子βⅠ型受体胞内域(transforming growth factor-βtypeⅠreceptor intracellular domain,TβRⅠ-Ⅰ)原核表达载体,诱导表达并纯化EgTβRⅠ-Ⅰ蛋白。方法采集感染Eg的羊源原头蚴,Trizol法提取原头蚴总RNA,RT-PCR扩增EgTβRⅠ-Ⅰ基因片段,克隆至原核表达载体pET28a(+),经限制性内切酶双酶切和序列鉴定正确的重组质粒转化至大肠埃希菌感受态细胞BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经镍柱亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。结果 pET28a-EgTβRⅠ-Ⅰ原核表达载体构建成功,经IPTG诱导可表达EgTβRⅠ-Ⅰ蛋白(分子质量单位为48ku),纯化后获得大量纯度较高的可溶性蛋白。结论成功构建pET28a-EgTβRⅠ-Ⅰ原核表达载体,并获得纯化的可溶性目的蛋白,为研究EgTβRⅠ-Ⅰ在Eg体内的生物学作用及其作用方式奠定了基础。
【作者单位】： 新疆医科大学第一附属医院 新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地 新疆包虫病基础医学重点实验室;新疆医科大学第一附属医院肝胆腔镜外科;
【基金】：国家自然科学基金项目(No.81260252,81101271) 长江学者和创新团队发展计划(No.IRT1181)
【分类号】：R392
【正文快照】： 棘球蚴病又称包虫病(Hydatid disease)是棘球绦虫的幼虫感染所致的严重人畜共患寄生虫病,呈世界性分布[1]。我国存在的包虫病类型主要是由细粒棘球蚴感染所致的囊型包虫病和多房棘球蚴感染所致的泡型包虫病,其中尤以囊型包虫病多见,约占包虫病病人总数的97%以上[2]。包虫在与

【共引文献】

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1 阿依甫汗·阿汗;吐尔干艾力·阿吉;邵英梅;温浩;哈丽娅;;棘球蚴抗原B对小鼠1型糖尿病拮抗作用研究[J];吉林医学;2014年01期

2 庞楠楠;刘朝华;张峰波;朱sソ，

本文编号：1307881