白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP杂交瘤细胞的制备及其分泌单克隆抗体的检测

发布时间：2017-12-19 17:08

  本文关键词：白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP杂交瘤细胞的制备及其分泌单克隆抗体的检测　出处：《中国实验血液学杂志》2013年06期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：本研究旨在制备针对白血病干细胞表面标志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。用重组人IL1RAP作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0细胞经PEG融合,筛选阳性杂交瘤细胞株。分别应用ELISA和Western blot法对杂交瘤细胞上清中分泌抗体进行抗体类型、滴度和敏感性检测。分离人外周单个核细胞,检测所得抗体对细胞内源性抗原的特异性。结果表明,获得了8株可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为3H6E10、4B6A6、8G11B5、9E9F2、10D8A7、1C7H7、1D7G11和2D3D3;抗体类型鉴定为IgG1/κ型;分泌的单克隆抗体能特异性识别单个核细胞表达的IL1RAP。结论:本实验成功制备了可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细胞及其特异性的IL1RAP单克隆抗体,为将来有效清除体内白血病干细胞提供了新途径。
【作者单位】： 徐州医学院移植免疫实验室;徐州医学院附属医院血液科;
【基金】：国家自然科学基金(编号81200376,81270637) 中国博士后科学基金资助项目(编号2012M510141) 江苏省"六大人才高峰"资助(编号2012-WSN-082) 徐州医学院院长专项人才基金(编号2012KJZ13)
【分类号】：R392
【正文快照】： IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)是最近报道的白血病干细胞(LSC)的表面标志[1,2]。IL1RAP基因位于3q28,表达翻译形成膜IL1RAP和可溶性IL1RAP两种形式。IL1RAP在慢性髓系白血病(CML)病人的LSC上表达显著升高,但在正常造血干细胞(HSC)上不表达或仅低表达,而在正常的造

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