乙肝免疫球蛋白抗体的多样性

发布时间：2017-12-24 01:33

  本文关键词：乙肝免疫球蛋白抗体的多样性　出处：《解剖学报》2013年04期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的基于重链可变区的编码基因序列对乙肝免疫球蛋白(HBIG)中的IgG抗体进行分类。方法借用文献提供的引物,以HBsAb强阳性健康个体外周血中的总RNA为模板进行RT-PCR和Nested-PCR扩增,通过将产物克隆到T载体、随机挑选测序,分析并统计出插入子的VH-D-JH-Cγ组合方式。结果共获得56个有效克隆,全部为人VH3-D-JH-Cγ序列,可分成49种序列,其中5种序列有2或3个序列完全相同的克隆。4个Cγ功能基因也全部出现,其中IGHG2频率最高(28次);23个VH3功能基因有11个出现,其中频率最高的是IGHV3-23(29次);23个D功能基因有16个出现,其中频率最高的是IGHD1-26(8次);6个JH功能基因则全部出现,其中频率最高的是IGHJ4(33次)。VH3-D-JH组合有33种,频率最高的是IGHV3-23/IGHD1-26/IGHJ4(8次),其中5种与IGHG2拼接,但这5种VH3-D-JH-Cγ2序列仍有明显的差异。结论成功地从HBsAb强阳性健康个体外周血中克隆到由VH3亚家族参与重排的IgG重链可变区序列;初步证实可变区序列不仅在VH3-D-JH-Cγ组合方式上具有极大的多样性,而且在序列上也具有明显的差异性;基于可变区测序对IgG抗体或B细胞进行分类是可行的,但需大大提高挑取克隆的数量或改用新一代大规模测序技术。
【作者单位】： 舟山医院细胞分子生物学实验室;舟山医院-中国科学院北京基因组研究所免疫基因组学联合实验室;舟山医院检验中心;舟山医院传染科;
【基金】：浙江省自然科学基金资助项目(2010KYB141)
【分类号】：R392
【正文快照】： 在紧急预防乙肝病毒(HBV)感染时,输注乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)是最常用及最有效的措施[1]。然而,HBIG是用乙肝疫苗接种献血员后分离的混合血浆,其来源、品质和安全均难以得到有效的保障,临床上迫切需要一种较为理想的HBIG替代品[2]。目前认为,HBIG的

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