小鼠肥大细胞蛋白酶4的原核表达和多克隆抗体制备

发布时间：2017-12-25 03:16

  本文关键词：小鼠肥大细胞蛋白酶4的原核表达和多克隆抗体制备　出处：《合肥工业大学学报(自然科学版)》2013年10期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：文章构建小鼠肥大细胞蛋白酶4(mMCP-4)原核表达体系,获得原核表达蛋白,并制备兔抗mMCP-4多克隆抗体,提取小鼠脾细胞总RNA,运用RT-PCR技术获得目的基因mMCP-4,构建重组原核表达载体pET28a-mMCP-4,将其转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。mMCP-4融合蛋白经Ni亲和层析法纯化后,作为抗原免疫兔子获得mMCP-4多克隆抗体。采用ELISA法测抗体效价,western blot检测抗体特异性。结果表明,构建重组表达质粒pET28a-mMCP-4,经大规模原核表达获得大量mMCP-4融合蛋白,制备的兔抗血清效价达1∶128 000,并表现出较好特异性。研究结果为进一步研究mMCP-4生物学功能奠定了基础。
【作者单位】： 合肥工业大学生物与食品工程学院;
【基金】：安徽省自然科学基金资助项目(11040606M92)
【分类号】：R392
【正文快照】： 肥大细胞在人体内参与伤口愈合、血管发生、天然免疫和获得性免疫,目前研究表明,肥大细胞在多发性硬化、风湿性关节炎、动脉粥样硬化、主动脉瘤、癌症以及饮食导致的肥胖和糖尿病等疾病中起重要作用[1]。成熟的肥大细胞通过脱颗粒分泌大量生物活性物质,包括生物胺类(如组胺和

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1331125