补肾通络法组方对骨性关节炎模型大鼠软骨细胞微丝结构的影响
本文关键词：补肾通络法组方对骨性关节炎模型大鼠软骨细胞微丝结构的影响 出处：《安徽中医药大学》2016年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：1目的通过改良Hulth方法完成SD大鼠膝骨性关节炎模型的构建,观察补肾通络法组方对该模型大鼠膝关节软骨细胞骨架微丝结构的影响,进而探究补肾通络发组方治疗膝骨性关节炎的分子机制。2方法从动物饲养中心购买60只SD大鼠将其随机分为4组,这4组包括JS(假手术)组、MX(模型)组、XY(西药,布洛芬)组,ZY(中药)组,每组各自分得15只。四组中,MX组、XY组、ZY组均采用改良Hulth方法进行模型的制作,(手术方法:离断SD大鼠右侧膝关节内侧副韧带、前交叉韧带,完整分离出内侧半月板),JS组的老鼠只切开关节囊。术后常规饲养六周,建立膝骨性关节炎动物模型,以X线是否符合骨关节炎的表现来确定造模是否成功,确定造模成功后第一天起开始给药。各组的用药剂量:JS组、MX组分别给予生理盐水(1ml/100g)灌胃;XY组给予布洛芬混悬液(1ml/100g)灌胃;ZY组给予中药(1ml/100g)灌胃;各组给药频率均为一天一次,连续灌胃6周。于喂药六周后,处死全部实验SD大鼠,取大鼠右股骨内外髁进行大体观察。大体观察后对所有右股骨髁进行常规脱钙、蜡块包埋和切片。对上述切片进行HE染色,观察右股骨内外髁软骨组织形态。同时采用改良Mankin’s评分法对软骨组织进行评定。取上述切片采用免疫荧光标记法对软骨细胞骨架微丝进行荧光染色,使用CLSM对微丝进行形态学观察和荧光强度的检测。3结果(1)大体观察:JS组右股骨内外侧髁软骨面光滑无退变。MX组右股骨内外侧髁软骨面退变严重。XY组右股骨内外侧髁软骨面退变明显,但外侧同内侧相比较轻。ZY组右股骨内侧髁软骨面轻度退变,外侧髁光滑无退变。(2)软骨组织学观察:JS组股骨内外侧髁软骨的四层结构完整,软骨细胞数量正常。MX组股骨内外侧髁部分区域软骨的四层结构均有损坏,软骨细胞的数量有所减少,内侧损伤较轻。XY组股骨内侧髁部分区域损伤到软骨肥大细胞层,细胞数量减少,外侧髁软骨损伤到中间层,细胞数量增多。ZY组股骨内侧髁软骨的表浅层有损伤,软骨细胞数量正常,外侧髁软骨同JS组无异。(3)微丝结构的观察:JS组股骨内外侧髁软骨的微丝为与细胞长轴平行的线状纤维。MX组股骨内外侧髁软骨微丝发生明显的固缩。XY组股骨内侧髁软骨微丝发生明显的固缩,外侧软骨微丝适度的增粗和固缩,但程度较内侧轻。ZY组股骨内外侧髁软骨的微丝与JS组相比保持着较好的线状形态。(4)Mankin’s评分:组间比较:对股骨内外侧髁软骨四组间的Mankin’s评分进行比较,四组不完全相等(p0.01);分别对四组间内侧和外侧髁软骨的Mankin’s评分进行两两比较,发现四组中内侧髁任意两组间的差异均有统计学意义,外侧髁任意两组间的差异均有统计学意义。四组间的内外侧髁的Mankin’s评分表现的趋势一样,MX组最高,其次是XY组,ZY组低于XY组但高于JS组。组内比较:除JS和MX组内外侧髁的Mankin’s评分的差异无统计学意义(p0.05),ZY和XY组内外侧髁的Mankin’s评分差异具有统计学意义(p0.01)。(5)微丝的定量分析:四组间股骨内外侧髁软骨细胞骨架微丝荧光定量分析,各组间内外侧髁的微丝含量差异均没有统计学意义(p0.05)。4结论(1)骨性关节炎关节软骨细胞骨架微丝结构有形态学形变;(2)补肾通络组方可以抑制膝骨性关节炎关节软骨细胞微丝形变,对保护软骨组织完整有一定作用;(3)正常软骨与骨性关节炎软骨细胞骨架微丝的含量无变化。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
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