富集兔毛囊干细胞构建组织工程化尿道的研究
本文关键词：富集兔毛囊干细胞构建组织工程化尿道的研究 出处：《上海交通大学学报(医学版)》2013年03期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的富集兔毛囊干细胞构建组织工程化尿道,观察其对尿道缺损的修复效果。方法应用机械分离与酶消化法分离培养兔毛囊细胞,体外原代培养扩增至3×106个,采用流式细胞仪富集毛囊干细胞,分选直径10μm的integrin-α6+/cd71-细胞,免疫荧光法检测细胞K19、p63和β1整合素表达。将毛囊干细胞接种于膀胱脱细胞基质支架材料上,构建组织工程化尿道,扫描电子显微镜观察细胞在支架上的分布状态。利用组织工程化尿道修复2.5 cm的兔尿道缺损,经尿道造影和组织学检查观察缺损修复效果。结果免疫荧光法检测结果显示毛囊干细胞K19、p63、β1整合素表达阳性。扫描电子显微镜观察发现细胞与支架紧密贴附,细胞伸展适度且有基质分泌。组织学检查和免疫组织化学检测发现,毛囊干细胞形成复层上皮结构,AE1/AE3染色阳性。组织工程化尿道修复缺损后3个月,尿道造影显示尿道平滑通畅。结论通过调整优化分选参数富集兔毛囊干细胞,构建的组织工程化尿道可用于修复兔尿道缺损。
[Abstract]:The purpose of the enrichment of rabbit hair follicle stem tissue-engineered urethra cells, observe the urethral defect repair effect. Isolation and culture of rabbit hair follicle cell method using mechanical separation and enzyme digestion method and cultured in vitro amplification to 3 x 106, using flow cytometry and enrichment of hair follicle stem cells, separation of 10 m diameter integrin- alpha 6+/cd71- cells, K19 cells was detected by immunofluorescence, expression of p63 and integrin beta 1. The hair follicle stem cells were seeded on bladder acellular matrix scaffolds and tissue-engineered urethra, scanning electron microscopy of cells on the scaffolds distribution. 2.5 cm repairing rabbit urethral defect using tissue engineered by urethra. Urethra angiography and histological examination to observe the repairing effect. Results the results of immunofluorescence showed that hair follicle stem cells K19, p63, the expression of integrin beta 1 positive cells found. With a scanning electron microscope Frame attached to cell spreading and proper matrix secretion. Histological and immunohistochemical detection of chemical examination found that the formation of epithelial structure of hair follicle stem cells, positive staining of AE1/AE3. 3 months after the repair tissue engineering urethra, urethral urethral smooth angiography showed patency. Conclusion by adjusting the separation parameters of cell enrichment in rabbits hair follicle stem, urethral tissue engineering construction can be used for repairing rabbit urethral defect.
【作者单位】： 南方医科大学附属珠江医院泌尿外科;中山市博爱医院泌尿外科;中山市古镇医院泌尿外科;
【分类号】：R329
【正文快照】： 组织工程技术修复尿道缺损的技术已较为成熟。口腔黏膜细胞,包皮表皮细胞都被成功用于构建组织工程尿道,成功修复尿道缺损[1-3]。毛囊干细胞一次性分离获取的数量较少,但其增殖分化能力强,至今毛囊干细胞用于构建组织工程尿道并修复尿道缺损的报道尚少,本研究拟探索分离培养
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，本文编号：1357802
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