分子伴侣促进截短型人乳头瘤病毒58亚型L1蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达

发布时间：2018-01-01 19:04

  本文关键词：分子伴侣促进截短型人乳头瘤病毒58亚型L1蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达　出处：《生物技术通讯》2017年03期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的:采用分子伴侣pTf16共表达的形式促进截短型人乳头瘤病毒(HPV)58亚型L1蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达。方法:将重组表达质粒pGEX-6P-HPV58-L1转入含有分子伴侣pTf16的大肠杆菌BL21感受态细胞中,在2.0 mg/mL L-阿拉伯糖诱导表达20 min之后加入1.0 mmol/L的IPTG,18℃诱导表达24 h,使目的蛋白与伴侣蛋白共表达;重组蛋白经GST亲和纯化后去除GST标签免疫昆明鼠,ELISA检测免疫血清效价。结果:分子伴侣pTf16能显著提高目的蛋白的可溶性表达,经纯化及去除GST标签,用SDS-PAGE与Western印迹检测,约在相对分子质量50×103处出现特异性反应条带,该条带与截短型HPV58 L1蛋白预期大小相符,免疫动物后经ELISA检测小鼠血清的抗体效价为1∶6400。结论:获得了截短型HPV58 L1蛋白,动物免疫试验证实该蛋白具有较好的免疫原性,为进一步研制HPV58预防型疫苗奠定了基础。
[Abstract]:Objective: to promote truncated human papillomavirus (HPV) by coexpression of molecular chaperone pTf16. Soluble expression of 58 subtype L1 protein in Escherichia coli. Methods:. The recombinant expression plasmid pGEX-6P-HPV58-L1 was transferred into Escherichia coli BL21 competent cells containing molecular chaperone pTf16. The expression was induced by 2.0 mg/mL L-arabinose for 20 min, then the expression was induced at 18 鈩，

本文编号：1365789