人类组织中TRAF3IP3基因表达的检测及转染胚肾HEK293细胞后的亚细胞定位

发布时间：2018-02-01 12:30

  本文关键词： TRAFIP 组织表达谱 亚细胞定位　出处：《第三军医大学学报》2013年14期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。方法采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾HEK 293细胞,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。结果实时定量PCR证实TRAF3IP3基因在被检测的11种组织中均有表达,其中在淋巴结、脾、骨髓、胃和睾丸中的表达水平较高;成功克隆了TRAF3IP3基因ORF区并构建成为荧光定位质粒,激光共聚焦显微镜观察证实TRAF3IP3蛋白主要定位于核膜,在核周呈颗粒状分布。结论 TRAF3IP3基因在淋巴细胞富集的器官呈高表达,可能参与免疫系统的发育、成熟及调控,其表达产物在细胞内主要定位于核膜及核周胞浆。
[Abstract]:Objective to clone TRAF3IP3 gene. The expression profile of TRAF3IP3 in some human tissues and the subcellular localization of its expression product were identified. Methods Real-time quantitative PCR was used to detect the expression of TRAF3IP3 gene in human tissues. The situation; TRAF3IP3 gene was cloned and the eukaryotic subcellular localization plasmid was constructed. The plasmid was transfected into human embryonic kidney HEK 293 cells. Results Real-time quantitative PCR confirmed the expression of TRAF3IP3 gene in 11 tissues, including lymph nodes, spleen and bone marrow. The expression level was higher in stomach and testis. The ORF region of TRAF3IP3 gene was cloned and constructed into fluorescent localization plasmid. Laser confocal microscopy showed that TRAF3IP3 protein was mainly located in nuclear membrane. Conclusion TRAF3IP3 gene is highly expressed in the organs enriched with lymphocytes, which may be involved in the development, maturation and regulation of the immune system. The expression products were mainly located in nuclear membrane and perinuclear cytoplasm.
【作者单位】： 河北联合大学生命科学学院;河北联合大学附属医院病理科;
【基金】：国家自然科学基金(81072093)~~
【分类号】：R341
【正文快照】： TRAF3IP3(TRAF3 interacting protein 3)是2003年发现的一个人类基因,又被称作T3JAM[TRAF3-inter-acting Jun N-terminal kinase(JNK)-activating modula-tor]。该基因编码产物特异性地与TRAF3(TNF recep-tor-associated factor 3)蛋白相互作用,募集TRAF3形成垢剂不溶的复合物

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本文编号：1481863