小鼠睾丸支持细胞对人脐带间充质干细胞增殖能力的影响
本文关键词: 脐带间充质干细胞 支持细胞 共培养 体外培养 免疫组织化学 流式细胞术 小鼠 出处:《解剖学报》2013年03期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的探讨睾丸支持细胞(SCs)对体外培养人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖能力的影响。方法体外分离培养并鉴定hUCMSCs和SCs;Transwell-insert系统共培养SCs和hUCMSCs(共培养组);普通DMEM-F12培养基培养的hUCMSCs作为对照(对照组);添加细胞因子(白细胞介素-3,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)的DMEM-F-12培养基培养的hUCMSCs作为阳性对照(细胞因子组)。用流式细胞术、免疫细胞化学等方法检测SCs对hUCMSCs增殖、细胞周期、表面标记分子表达的影响,透射电镜观察细胞超微结构。结果与对照组相比,共培养组和细胞因子组hUCMSCs增殖明显加快,以共培养组尤为显著(P0.05);共培养组和细胞因子组hUCMSCs表面分子CD29和CD105阳性率均增高;细胞周期分析显示,共培养组G0/G1期细胞数与对照组相比无明显改变,而细胞因子组略有减少。透射电镜观察对照组与共培养组细胞均呈现原始细胞的超微结构特点。结论SCs共培养可促进hUCMSCs增殖,且共培养后仍保持其干细胞特性。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of testicular Sertoli cells (SCS) on the proliferation of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSCs) cultured in vitro. Methods hUCMSCs and SCS-Transwell-insert system co-cultured SCs and hUCMSCswere isolated and identified in vitro. HUCMSCs served as control (control group); hUCMSCs cultured on DMEM-F-12 medium supplemented with cytokines (interleukin-3, granulocyte-macrophage colony stimulating factor) was used as positive control (cytokine group). Flow cytometry was used. The effects of SCs on the proliferation, cell cycle and expression of surface marker molecules of hUCMSCs were detected by immunocytochemistry. The ultrastructure of cells was observed by transmission electron microscope. Results compared with the control group, the proliferation of hUCMSCs in co-cultured and cytokine groups was significantly accelerated. The positive rates of hUCMSCs surface molecules CD29 and CD105 were increased in co-culture group and cytokine group, and cell cycle analysis showed that the number of G0 / G1 phase cells in co-cultured group was not significantly different from that in control group. The ultrastructural characteristics of the cells in the control group and co-culture group were observed by transmission electron microscope. Conclusion SCs co-culture can promote the proliferation of hUCMSCs and maintain its stem cell characteristics after co-culture.
【作者单位】: 贵阳医学院组织学与胚胎学教研室;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81160099) 贵州省社会发展科技攻关项目[黔科合SY(2009)3071] 贵州省教育厅资助项目[黔教高发(2010)305]
【分类号】:R329.24
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,本文编号:1533858
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