HCV结构蛋白E2在果蝇S2细胞中的稳定表达

发布时间：2018-03-11 06:52

  本文选题：HCV　切入点：包膜糖蛋白E　出处：《中国输血杂志》2013年10期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的获得在果蝇S2(S2)细胞中稳定表达的重组丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白2(rE2)。方法 PCR扩增截短型E2基因,克隆至pCR2.1-T载体,将测序正确的基因亚克隆至表达载体pMT/Bip/V5-HisC,构建重组表达载体pMT-E2。用FuGENE HD转染试剂将pMT-E2转染至S2细胞,并筛选抗性细胞,然后诱导目的蛋白表达;以Western-blotting法鉴定表达产物与HCV感染者血清反应性。结果成功构建截短型HCV E2表达载体pMT-E2,并获得到稳定表达rE2蛋白的S2细胞株,Western-blotting法证明rE2具有良好的免疫学活性。结论在S2细胞成功表达的HCV rE2蛋白可用于HCV感染者血清的鉴定,为HCV诊断性抗原的优化和重组疫苗的研发提供了实验材料。
[Abstract]:Objective to obtain recombinant hepatitis C virus (HCV) envelope glycoprotein 2rE2, which is stably expressed in Drosophila S2nS2.Methods truncated E2 gene was amplified by PCR and cloned into pCR2.1-T vector. The recombinant expression vector pMT-E2was constructed by subcloning the correct gene into the expression vector pMT-Bip-V5-HisC. the pMT-E2 was transfected into S2 cells with FuGENE HD transfection reagent, and the resistant cells were screened, then the target protein expression was induced. Results the truncated HCV E2 expression vector pMT-E2 was successfully constructed, and the S2 cell line expressing rE2 protein stably was obtained by Western-blotting. Conclusion rE2 has good immunological activity. The HCV rE2 protein successfully expressed in S2 cells can be used to identify the serum of HCV infected patients. It provides experimental materials for the optimization of HCV diagnostic antigen and the development of recombinant vaccine.
【作者单位】： 南方医科大学生物技术学院输血医学系;
【基金】：大学生创新创业训练计划项目(201212121060、201212121061) 广东省科技计划项目(2010B031000024、2012A080203003)
【分类号】：R392.1

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1597048