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幽门螺杆菌外膜蛋白Omp18表达载体构建及其多克隆抗体的制备

发布时间:2018-03-18 02:20

  本文选题:幽门螺杆菌 切入点:Omp 出处:《中国病原生物学杂志》2013年07期  论文类型:期刊论文


【摘要】:目的制备幽门螺杆菌的外膜蛋白Omp18及其多克隆抗体。方法设计Omp18基因引物,PCR扩增Omp18基因,将其连入pMD-18T载体,再克隆入原核表达载体pTriEx(TM)-4,重组质粒转化大肠埃希菌JM109DE,IPTG诱导表达Omp18蛋白,纯化后免疫家兔,以获得多克隆抗体。结果 PCR扩增的Omp18基因成功克隆入原核表达载体,重组原核表达载体转化菌表达Omp18蛋白,纯化的Omp18蛋白免疫动物后血清中获得多克隆抗体。结论本实验成功进行了Omp18蛋白的原核细胞表达并制备了多克隆抗体,为研究Omp18的功能、表达调控以及幽门螺杆菌检测和疫苗生产等奠定了基础。
[Abstract]:Objective to study the preparation of outer membrane protein Omp18 of Helicobacter pylori and its polyclonal antibody. The design method of Omp18 gene primers, PCR amplification of the Omp18 gene, which will be connected to pMD-18T vector and then cloned into the prokaryotic expression vector pTriEx (TM) -4. The recombinant plasmid was transformed into Escherichia coli JM109DE, IPTG induced expression of Omp18 protein, immunization of rabbits after purification and in order to obtain polyclonal antibody. The Omp18 gene was amplified by PCR was cloned into the prokaryotic expression vector, Recombinant Prokaryotic Expression Vector transformed bacteria Omp18 protein expression, polyclonal antibody was purified animal immune serum Omp18 protein. Conclusion after the success of the polyclonal antibody preparation of Omp18 protein expression in prokaryotic cells then, to study the function of Omp18, laid the foundation for regulation and expression of Helicobacter pylori detection and vaccine production.

【作者单位】: 泰山医学院病原学教研室/病原学研究所;山东省泰山疗养院内科;泰山医学院环境工程教研室;
【基金】:山东省自然科学基金项目(No.ZR2009CM028,ZR2009CQ003,ZR2012CQ035) 山东省高等学校科技计划项目(No.J11LF12,J10LF04) 山东省医药科技发展计划项目(No.2009HZ098) 泰山医学院科研项目(No.2012GCC01)
【分类号】:R378

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号:1627563


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