ZIKV GZ01感染性克隆的构建以及环化序列的生物学功能的初步研究
本文选题：寨卡病毒 + 反向遗传学系统 ； 参考：《暨南大学》2017年硕士论文
【摘要】：目的:寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)属于黄病毒科(flaviviridae)黄病毒属(flavivirus),其家族包括登革病毒(DENV),西尼罗病毒(WNV),日本脑炎病毒(JEV)和黄热病病毒(YFV)等黄病毒。自2013年以来,寨卡病毒持续在全球范围内肆虐与爆发,给人类健康带来巨大伤害,尽管科学和公共卫生界在过去几年中作出及时的合作和努力,但是寨卡病毒的出现和致病性机制在很大程度上仍然是未知的,且市面上并没有相应的疫苗和抗病毒药物。寨卡病毒感染性克隆的发展,对于解决寨卡病毒危机起到至关重要的作用。ZIKV反向遗传学系统可为研究ZIKV编码蛋白功能以及分子致病机理等方面提供可靠工具。方法:反向遗传学系统是研究病毒复制和致病性的最有力工具之一,现已广泛应用于疫苗设计和抗病毒筛选。在本课题中,成功构建了寨卡病毒广州01株全长感染性克隆,建立了寨卡病毒反向遗传学系统。于2016年分离了ZIKV GZ01,并使用自我剪接group Ⅱ内含子策略成功得到了全长感染性克隆。结果:使用构建的寨卡病毒广州01株全长感染性克隆转录的RNA在体外进行自我剪接,将剪接的RNA转染到BHK-21细胞中,并成功拯救了具有感染性病毒。亲本毒株和拯救的ZIKV具有相似的生长特征,蚀斑形态和神经毒力。结论:实验结果表明拯救的ZIKV保留了亲本毒株的生物学性质。此外,使用这种新建立的反向遗传学系统,已经揭示了一组RNA元件的关键作用,即环化序列(CS)对于寨卡病毒RNA复制的影响,突出了这种新的自剪接内含子策略在黄病毒感染性克隆的产生中的可靠性和潜力。
[Abstract]:Objective: Zika virus ZIKV belongs to flaviridae (flavivivirusus). Its families include Dengur virus (DENVV), West Nile virus (WNVV), Japanese Encephalitis virus (JEV) and Yellow Fever virus (YFV). Since 2013, the Zika virus has continued to wreak havoc and outbreaks around the world, causing great harm to human health, despite the timely cooperation and efforts of the scientific and public health community over the past few years. But the emergence and pathogenicity of Zika remain largely unknown and there are no vaccines or antiviral drugs available. The development of Zika virus infectious clone plays an important role in solving Zika virus crisis. ZIKV reverse genetic system can provide reliable tools for studying the function of ZIKV coding protein and molecular pathogenesis. Methods: reverse genetics system is one of the most powerful tools to study viral replication and pathogenicity, and has been widely used in vaccine design and antiviral screening. In this study, the full-length infectious clone of Zika virus strain Guangzhou 01 was successfully constructed, and the reverse genetic system of Zika virus was established. ZIKV GZ01 was isolated in 2016, and the full-length infectious clone was successfully obtained using self-splicing group II intron strategy. Results: the full-length infectious clone RNA of Zika virus strain Guangzhou 01 was spliced in vitro, the spliced RNA was transfected into BHK-21 cells, and the infectious virus was successfully saved. Parental strain and ZIKV had similar growth characteristics, plaque morphology and neurovirulence. Conclusion: the experimental results show that the saved ZIKV retains the biological properties of the parent strain. In addition, the use of the newly established reverse genetics system has revealed the key role of a set of RNA elements, namely, the effects of cyclic sequences on the replication of Zika virus RNA. It highlights the reliability and potential of this new self-splicing intron strategy in the production of yellow virus infectious clones.
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R373
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 唐丽云;;构建猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的研究进展[J];广东畜牧兽医科技;2011年06期
2 徐绍建;李俊;曹帅;时建立;周顺;徐文;张秀美;王金宝;;猪圆环病毒2型全序列分析及感染性克隆的构建[J];中国兽医杂志;2009年01期
3 王光祥;郑海学;尚佑军;刘艳红;常艳燕;田宏;吴锦艳;陈江涛;刘湘涛;;猪圆环病毒2型感染性克隆的构建[J];中国兽医科学;2009年11期
4 王明亮;刁有祥;纪巍;孔义波;高继明;;猪圆环病毒2型感染性克隆的构建[J];中国兽医学报;2011年03期
5 吕健;韦祖樟;高飞;郑海红;童光志;袁世山;;猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定[J];畜牧兽医学报;2012年10期
6 李祥健;张建武;吕健;余丹丹;姚火春;袁世山;;猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用[J];生物工程学报;2008年09期
7 韩秀娥;全滟平;高旭;相文华;周建华;;马传染性贫血病毒N-连接糖基化回复突变的感染性克隆构建[J];微生物学报;2008年03期
8 朱丽杰;李刚;曲哲会;王君伟;;口蹄疫病毒全长cDNA感染性克隆的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2008年02期
9 吴海祥,张楚瑜;正链RNA病毒基因组感染性克隆研究进展[J];武汉大学学报(理学版);2002年04期
10 邵小雪;周双海;谢俊岭;冉多良;;猪圆环病毒1型感染性克隆的构建[J];中国兽医科学;2011年02期
相关会议论文 前10条
1 周双海;谢俊岭;;猪圆环病毒2型感染性克隆构建的比较分析[A];“生泰尔”杯全国养猪技术征文大赛——中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛论文集[C];2012年
2 刘长明;危艳武;陆月华;张朝霞;袁婧;黄立平;;猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
3 李祥健;张建武;吕健;余丹丹;姚火春;袁世山;;猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
4 李薇;余兴龙;罗维;白霞;李润成;黎满香;葛猛;王亚;向卫军;李晶;;三种亚群PCV-2感染性克隆的构建及体内外感染性试验[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（上册）[C];2009年
5 徐卓菲;司有辉;刘瑞峰;钱平;李祥敏;陈焕春;;猪瘟病毒兔化弱毒株感染性克隆平台的构建[A];2006年度学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
6 陈义锋;赵亚荣;赵建增;;PRRSV感染性克隆及其在疫苗研究中的应用[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
7 张考;仲飞;李秀锦;陈慧慧;李文艳;温洁霞;;含绿色荧光蛋白基因的PRRSV感染性克隆的制备及特性分析[A];全国动物生理生化第十二次学术交流会论文摘要汇编[C];2012年
8 孔义波;张兴晓;姜世金;赵钦;孙亚妮;;内源性禽白血病病毒SD0501株感染性克隆的构建及鉴定[A];山东畜牧兽医学会禽病学专业委员会第一次学术研讨会论文集[C];2009年
9 潘梦;杨小蓉;郭鑫;张大丙;杨汉春;;3型鸭甲肝病毒C-GY株全长感染性克隆的构建和病毒拯救的鉴定[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
10 李爽;章丽娇;孙海港;苏文良;韩博;苏敬良;;鸭BYD病毒全长感染性克隆的构建与拯救病毒鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集[C];2012年
相关博士学位论文 前10条
1 陈浩;坦布苏病毒ZC株感染性克隆的构建和部分3’非编码区功能的初步研究[D];山东农业大学;2015年
2 郗冀;新型水貂阿留申病毒感染性克隆的构建及其生物学特性鉴定[D];中国农业大学;2016年
3 陈君豪;DPoly(A)尾的长度对DHAV-1增殖的影响[D];山东农业大学;2016年
4 黄柏成;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的构建及其在病毒可视化示踪上的研究和应用[D];西北农林科技大学;2015年
5 张善瑞;高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒及其弱毒感染性克隆的构建和应用[D];中国农业科学院;2010年
6 黄勤锋;猪繁殖与呼吸综合征病毒的感染性克隆及其复制子载体的研究[D];华中农业大学;2009年
7 于可响;鸭坦布苏病毒生物学特性、基因组特征、诊断方法以及感染性克隆的研究[D];扬州大学;2013年
8 于敏;猪戊型肝炎病毒全基因组序列分析及感染性克隆的构建[D];东北农业大学;2007年
9 耿合员;人冠状病毒NL63中国株全基因组的测序与感染性克隆构建[D];中国疾病预防控制中心;2014年
10 张辉;伪狂犬病毒间质蛋白UL14功能研究及TK～-/gG～-株感染性克隆构建[D];华中农业大学;2007年
相关硕士学位论文 前10条
1 于九洋;ZIKV GZ01感染性克隆的构建以及环化序列的生物学功能的初步研究[D];暨南大学;2017年
2 王利月;表达绿色荧光蛋白的北美Ⅱ型PRRSV感染性克隆的制备及特性分析[D];河北农业大学;2015年
3 张潞;牛1型腺病毒感染性克隆的构建及拯救[D];西北农林科技大学;2015年
4 李丹丹;犬瘟热病毒SH株的分离鉴定及其感染性克隆的构建[D];西北农林科技大学;2016年
5 赵款;PRRSV HuN4株和CH-1a株感染性克隆及其嵌合病毒的构建及其初步应用[D];中国农业科学院;2016年
6 王伟丞;携带遗传标记的猪圆环病毒2型贵州分离株感染性克隆的构建[D];贵州大学;2015年
7 龚茜;PCV2 Cap蛋白Loop DE区域氨基酸的功能研究[D];湖南农业大学;2016年
8 王占锋;猪圆环病毒2型湖南分离株全基因扩增及感染性克隆构建[D];湖南农业大学;2016年
9 陈海云;鸡传贫病毒安徽分离株感染性克隆的构建及其凋亡素抗体的制备[D];安徽农业大学;2015年
10 李海敏;Jiv蛋白对猪瘟病毒复制的作用及猪瘟病毒C株感染性克隆的构建[D];西北农林科技大学;2017年
，本文编号：1809739
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/1809739.html
