登革2型病毒体外诱导Ana-1巨噬细胞极化及其TLR7表达的研究

发布时间：2018-06-16 21:24

  本文选题：登革型病毒 + 巨噬细胞　； 参考：《中国免疫学杂志》2013年07期

【摘要】：目的:研究登革2型病毒体外诱导Ana-1细胞极化及TLR7表达情况,分析其在登革病毒致病过程中的可能作用。方法:用DEN2感染Ana-1细胞,24、72、120小时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测病毒核酸、iNOS、Arg-1、IL-10、IL-12p40 mRNA;Western blot检测iNOS、Arg-1、TLR7蛋白;双抗体夹心ELISA法检测TNF-α水平。结果:巨噬细胞被DEN2感染后病毒核酸在72小时达峰值,2-ΔΔCt值为159.98±37.80;iNOS mRNA及蛋白表达明显上升(P0.05),IL-12p40 mRNA、TNF-α水平显著升高(P0.05),72小时达峰值;IL-12p40 mRNA 2-ΔΔCt值为11.1±2.41,TNF-α浓度为(454.72±13.41)pg/ml。Arg-1 mRNA及蛋白较M2型极化对照组降低(P0.05);IL-10 mRNA与正常对照组无显著差异(P0.05);TLR7表达低于同期正常对照组。结论:Ana-1细胞被DEN2感染后向M1型极化;DEN2可下调Ana-1细胞TLR7表达,可能是DEN2发生免疫逃逸的机制之一;Ana-1细胞TNF-α水平与细胞内DEN2核酸呈正相关。
[Abstract]:Aim: to study the polarization and expression of TLR7 in Ana-1 cells induced by dengue 2 virus in vitro and to analyze its possible role in the pathogenesis of dengue virus. Methods: Ana-1 cells infected with DEN2 for 24 ~ 72120 hours were used to detect the level of TNF- 伪 by double antibody sandwich Elisa. The viral nucleic acid (iNOSN) Arg-1 IL-10 IL-12p40 mRNA-Western blot was used to detect the level of TLR7 protein in Ana-1 cells infected with DEN2, and the double antibody sandwich Elisa was used to detect the level of TNF- 伪. Results: the expression of iNOS mRNA and protein in macrophages reached a peak value at 72 hours after infection with DEN2. The expression of iNOS mRNA and protein was 159.98 卤37.80 mRNAs. The level of IL-12p40 mRNA-TNF- 伪 in macrophages was significantly higher than that of M2 type. The level of IL-12p40 mRNA 2- 螖 Ct was 11.1 卤2.41TNF- 伪 in macrophages at 72 hours. The level of IL-12p40 mRNA and protein in macrophages was significantly higher than that in M2 type. There was no significant difference between the control group and the normal control group in the expression of IL-10 mRNA. The expression of TLR7 in the control group was lower than that in the control group. Conclusion the expression of TLR7 in Ana-1 cells can be down-regulated after infection by DEN2, which may be one of the mechanisms of immune escape of DEN2. TNF- 伪 level of Ana-1 cells is positively correlated with the intracellular DEN2 nucleic acid.
【作者单位】： 贵阳医学院免疫学教研室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.31060129) 贵州省优秀人才省长基金 贵州省教育厅“125”重大科技专项 贵州省社会发展合作专项资金项目(黔科合〔2010〕3155)资助
【分类号】：R392.12

【参考文献】

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本文编号：2028159