融合蛋白LL-37-haFGF的复性及纯化条件研究
本文选题:LL- + haFGF ; 参考:《生物技术通报》2013年04期
【摘要】:首次设计开发一种促愈合,抗细菌感染的多肽分子——人源抗菌肽LL-37修饰haFGF的融合蛋白,旨在探讨此新型融合蛋白LL-37-haFGF的复性及纯化条件。利用重组大肠杆菌表达LL-37-haFGF并鉴定,初步考察8种复性添加小分子对其包涵体复性的作用,经分析表明,添加0.3 mol/L精氨酸可以大大提高LL-37-haFGF的复性效率。经镍亲和色谱及CM阳离子色谱纯化获得纯品。本研究获得了5.9 mg纯度为95.43%的LL-37-haFGF目的蛋白,为研究其功能奠定了基础,也为类似的双功能多肽的制备提供了参考依据。
[Abstract]:The fusion protein of haFGF modified by human antibacterial peptide LL-37 was designed and developed for the first time in order to investigate the renaturation and purification conditions of the novel fusion protein LL-37-haFGF. LL-37-haFGF was expressed by recombinant Escherichia coli and identified. The effects of 8 kinds of refolding small molecules on the renaturation of inclusion bodies were investigated. The results showed that the addition of 0.3 mol / L arginine could greatly improve the renaturation efficiency of LL-37-haFGF. The purified product was purified by nickel affinity chromatography and CM cation chromatography. In this study, a 5.9 mg LL-37-haFGF target protein with a purity of 95.43% was obtained, which laid a foundation for the study of its function and provided a reference for the preparation of similar bifunctional peptides.
【作者单位】: 广东药学院生命科学与生物制药学院;广东药学院广东省生物活性药物研究重点实验室;
【基金】:广州市科技支撑计划项目(2010J-E411) 广东省教育厅育苗计划(LYM11082)
【分类号】:R341
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,本文编号:2057382
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