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Hes1 mRNA在神经干细胞向神经细胞分化过程中表达变化的研究

发布时间:2018-06-28 14:48

  本文选题:海马 + Hes ; 参考:《重庆医学》2013年33期


【摘要】:目的探讨Hes1mRNA在神经干细胞(NSC)向神经细胞分化过程中的表达变化。方法构建乳鼠海马NSC的细胞培养模型,对NSC增殖分化进行形态学观察。细胞分化前后,采用免疫化学染色法分别检测巢蛋白(Nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,以鉴定细胞类型。流式细胞仪检测细胞周期以确定细胞增殖活性。用逆转录-PCR(RT-PCR)检测NSC中Hes1mRNA的表达变化情况。结果从海马分离培养的细胞生长状态良好,有克隆增殖能力,呈Nestin表达阳性,细胞分化后呈NSE表达阳性。流式细胞仪检测结果显示,诱导前NSC增殖活跃,其S期的细胞比例明显高于诱导分化各阶段的细胞比例(P0.01)。与诱导前NSC相比,分化细胞各阶段G0G1期细胞比例则显著增多(P0.01),细胞停滞于G0G1期。RT-PCR结果表明,Hes1mRNA在NSC诱导分化前后均有表达,与诱导前相比,分化后的各阶段Hes1mRNA表达量均明显减少(P0.05),而分化各阶段Hes1mRNA表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论 Hes1mRNA的高表达可能与NSC的增殖有关,而Hes1mRNA表达的减弱则有利于神经细胞的大量分化。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of Hes1 mRNA in neural stem cells (NSC). Methods the cell culture model of hippocampal NSC was established and the proliferation and differentiation of NSC were observed. The expression of nestin and neuron-specific enolase (NSE) were detected by immunocytochemical staining before and after differentiation to identify the cell types. Cell cycle was measured by flow cytometry to determine cell proliferation activity. The expression of Hes1 mRNA in NSC was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results the cells isolated from the hippocampus grew well and had the ability to clone and proliferate. The cells showed nestin positive expression and NSE expression after differentiation. The results of flow cytometry showed that the proliferation of NSC was active before induction and the proportion of cells in S phase was significantly higher than that in all stages of differentiation (P0.01). Compared with NSC before and after induction, the proportion of G0G1 phase cells increased significantly (P0.01). The results of RT-PCR showed that Hes1 mRNA was expressed before and after induction of NSC, and compared with that before induction. The expression of Hes1 mRNA decreased significantly in all stages of differentiation (P0.05), but there was no significant difference in Hes1 mRNA expression in all stages of differentiation (P0.05). Conclusion the high expression of Hes1 mRNA may be related to the proliferation of NSC, and the decrease of Hes1 mRNA expression is beneficial to the differentiation of nerve cells.
【作者单位】: 新乡医学院生理学与神经生物学教研室;
【基金】:河南省新乡医学院高学历人才科研资助项目(2007502002)
【分类号】:R329

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号:2078332

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